詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
申克孢子細(xì)菌PCR檢測試劑盒品牌參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
申克孢子細(xì)菌PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
申克孢子細(xì)菌PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
3.5% NaC1氨基酸脫羧酶對照發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
人腎管狀上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
NZM瓊脂/NZM AgarBR100克國產(chǎn)/進口
人角膜上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
放線菌肉湯培養(yǎng)基/Actinomycete Broth Medium250克國產(chǎn)/進口
家貓肺成纖維樣細(xì)胞英文名稱:CatL1
卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)/EYA培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Egg Yolk Agar Medium Base肉毒梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
大鼠腦微血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
hFOB 1.19(SV40轉(zhuǎn)染人成骨細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CCDA添加劑/CCDA Supplement添加于200Lccda基礎(chǔ)中2毫升×10支國產(chǎn)/進口
TG-905(人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
申克孢子細(xì)菌PCR檢測試劑盒品牌IRX5 Iroquois同源蛋白5抗體 0.2ml
GLUT5 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白5抗體 0.1ml
Rabbit Anti-Biotin/Bio 生物素標(biāo)記的兔抗生物素抗體IgG 0.1ml
Phospho-NPM (Thr95) 磷酸化核仁磷酸蛋白抗體 0.1ml
RELN/Reelin 絡(luò)絲蛋白抗體 0.1ml
phospho-B-Raf (Thr401) 磷酸化B-Raf抗體 0.1ml
DDCT/DDT D型多巴色素脫羧酶 0.2ml
FAM76B FAM76B蛋白抗體 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 0.1ml
ASB4 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族4抗體 0.2ml
ADAMTSL3 整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶樣2蛋白抗體 0.2ml
Transaldolase 1 轉(zhuǎn)醛醇酶抗體 0.2ml