詳細(xì)介紹
人葡萄球菌PCR檢測試劑盒品牌使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
人葡萄球菌PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
人葡萄球菌PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
LB瓊脂/LB Agar大腸桿菌增殖250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人腦靜脈血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
布氏瓊脂/Brucella Agar彎曲桿菌的抗生素敏感性試驗(yàn)和純培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人成骨肉瘤細(xì)胞英文名稱:MG-63
抗生素Ⅰ號(hào)培養(yǎng)基(PH7.8-8.0)/抗生素1號(hào)培養(yǎng)基(PH7.8-8.0)/阿奇霉素檢定培養(yǎng)基/Antibiotic Agar 鏈霉素、卡那霉素、慶大霉素、克拉霉素、妥布霉素、阿米卡星紅霉素、阿奇霉素等藥品效價(jià)測定250克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
瓊脂粉/寒天/瓊脂/洋菜/石花菜/瓊膠/AgarBR,強(qiáng)度1200g/c㎡500/2500克國產(chǎn)/進(jìn)口
WM35, 人黑色素瘤細(xì)胞
液體沙氏培養(yǎng)基/沙堡氏4%葡萄糖瓊脂肉湯/薩布羅氏葡萄糖瓊脂肉湯/SDB霉菌和酵母菌的增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
SDS-PAGE分離膠緩沖液(4x)500ml國產(chǎn)
MDA-MB-175VII(人腺導(dǎo)管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人葡萄球菌PCR檢測試劑盒品牌Goat Anti-rat IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml
phospho-Tau protein(Ser199) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
Phospho-PEA15(Ser116) 磷酸化星形膠質(zhì)細(xì)胞PEA15抗體 0.1ml
NGX6 鼻咽癌細(xì)胞相關(guān)基因6抗體 0.1ml
CCDC94 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白94抗體 0.2ml
phospho-c-kit(Tyr936) 磷酸化原癌基因c-kit抗體 0.1ml
phospho-EphB1/Eph receptor B1(Tyr331) 磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1抗體 0.1ml
MAS1L G蛋白偶聯(lián)受體MAS相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
AKR1B10 醛糖還原酶相關(guān)蛋白質(zhì)抗體 0.2ml
SLY 2型豬鏈球菌溶血素抗體 1ml
phospho-MEK5(Ser311+Thr315) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體 0.1ml
MARCKS 丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗體 0.2ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。