詳細介紹
沃氏葡萄球菌PCR檢測試劑盒品牌使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
沃氏葡萄球菌PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
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自備物品:
沃氏葡萄球菌PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
NEC(人食管細胞)5×106cells/瓶×2
Nuclear and Cytoplasmic Extraction Kit/Nc-細胞核-漿蛋白抽提試劑盒50次國產(chǎn)gersion
D283 Med(人腦髓母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
MCF-7 [MCF7], 人腺細胞系
L1210(小鼠白血病細胞)5×106cells/瓶×2
Hep B1.2(人肝細胞)5×106cells/瓶×2
豬腎細胞英文名稱:PK(15)
CHO/中華倉鼠卵巢細胞株國產(chǎn)
小鼠結腸細胞英文名稱:CT-26 WT
7.5% NaHCO3溶液規(guī)格:100ml
人子宮內膜細胞英文名稱:Ishikawa
沃氏葡萄球菌PCR檢測試劑盒品牌Rabbit Anti-Biotin/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗生物素抗體IgG 0.1ml
Tuberin/TSC2 馬鈴薯球蛋白(結節(jié)性硬化)抗體 0.2ml
Phospho-Rb (Thr821) 磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關蛋白1抗體 0.1ml
Eukaryotic aspartyl protease 天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗體 1ml
KMT3B/NSD1/ARA267 組蛋白甲基化KMT3B抗體(雄激素受體激活蛋白) 0.2ml
Gentamicin 慶大霉素抗體 0.2ml
CASC3/MLN51 腫瘤易感候選基因3抗體 0.1ml
ATM 毛細血管擴張性共濟失調癥突變蛋白抗體 0.1ml
WT-1/Wilms Tumor Protein 腎母細胞瘤蛋白抗體 0.1ml
E-cadherin/CD324 上皮鈣粘附分子抗體 0.1ml
PNMT 苯甲基轉移酶抗體 0.2ml
MMP-16 基質金屬蛋白酶-16抗體 0.1ml
反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。