詳細介紹
肺炎鏈球菌PCR檢測試劑盒品牌使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
肺炎鏈球菌PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
肺炎鏈球菌PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
AML-193(人急性單核細胞白血病單核細胞)5×106cells/瓶×2
MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元gersion
P388D1(小鼠淋巴樣瘤細胞)5×106cells/瓶×2
HuH-6(人肝母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2
C-33 A(人子宮頸細胞)5×106cells/瓶×2
ECV-304(人臍靜脈內(nèi)細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠軟骨細胞*培養(yǎng)基100mL
Antibody-HRP DiluentHRP/標記抗體稀釋液(紅色)20ml國產(chǎn)
小鼠白血病細胞英文名稱:P388
2×YT瓊脂/2×YT Medium AgarBR250克國產(chǎn)/進口
人食管細胞英文名稱:Kyse510
肺炎鏈球菌PCR檢測試劑盒品牌PABP 多聚腺苷酸結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
SCN2A SCN2A抗體 0.1ml
CCZ1 CCZ1蛋白抗體 0.2ml
Spindly/CCDC99 亞砷鹽相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
PMS1 腫瘤錯配修復基因PMS1抗體 0.1ml
CYP3A4 細胞色素P450 3A4抗體 0.1ml
VHLH/Von Hippel Lindau 腦視網(wǎng)膜血管瘤G7蛋白抗體(逢希伯-林道氏?。?0.2ml
Shrimp tropomyosin 南美白對蝦過敏原蛋白(蝦原肌球蛋白)抗體 0.1ml
NR2C/NMDAR2C 谷氨酸受體2C抗體(N端) 0.1ml
phospho-MAP1LC3A(Ser12) 磷酸化自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體 0.1ml
Oct-4B(OCT4B-190)NT 胚胎干細胞關(guān)鍵蛋白190抗體(N端) 0.2ml
NHLRC1 肌痙攣性癲癇病相關(guān)EPM2蛋白抗體 0.2ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。