詳細(xì)介紹
無齒類圓線蟲PCR檢測試劑盒品牌使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
無齒類圓線蟲PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
無齒類圓線蟲PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
Campy-Cefex添加劑/Campy-Cefex Supplement添加于200ml CAMPY-CEFEX瓊脂基礎(chǔ)中2毫升×10支國產(chǎn)/進(jìn)口
TM3(小鼠睪間質(zhì)細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
伊紅染色液規(guī)格:100ml
H9c2(2-1) (大鼠心肌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠子宮頸上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
BT-549(人腺管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肺血管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)規(guī)格:1000次
人心臟微血管內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
Hoagland Nitrogen-free MediumBR20升國產(chǎn)/進(jìn)口
人膀胱移行細(xì)胞英文名稱:J82
無齒類圓線蟲PCR檢測試劑盒品牌Phospho-Beta-Catenin(Ser33/37) 磷酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 0.1ml
Dystrophin/DMD 肌營養(yǎng)不良蛋白 0.1ml
C12ORF24 12號染色體開放閱讀框24抗體 0.2ml
PIGR 多聚免疫球蛋白受體抗體 0.1ml
RNF25 環(huán)指蛋白25抗體 0.2ml
EphA4 酪氨酸蛋白激酶A4抗體 0.1ml
phospho-alpha Adducin(Ser726) 磷酸化內(nèi)收蛋白a1抗體 0.1ml
phospho-IGF1R(Tyr1161) 磷酸化胰島素樣生長因子1受體抗體 0.1ml
Donkey Anti-human IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml
Phospho-FLT3 (Tyr589/591) 磷酸化FMS樣酪氨酸激酶3 0.1ml
Tbx21/T-bet T細(xì)胞介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子Tbx21抗體 0.1ml
Mitoferrin 1 線粒體鐵轉(zhuǎn)運蛋白1抗體 0.2ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。