詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
塔那痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
塔那痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
塔那痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
人晶狀體上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
膽酸(牛)/牛膽酸/無水膽酸/膽汁酸/3,7,12-三羥甾代異戊酸/3α,7α,12α-三羥基-5β-膽烷酸/(3α,5β,7α,12α)-3,7,12-三羥基膽(甾)烷-24-酸單鈉鹽/Cholic acidBR,98%25/100/500克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
卵巢英文名稱:CoC2(懸浮)
李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基配套平皿/Listera Chromogenic Medium Dish9㎝/塊國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
糖肉湯培養(yǎng)基/Lactose Broth Medium用于食品中沙門氏菌檢驗(yàn)前增菌;大腸菌群的增菌培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
U251人膠質(zhì)瘤細(xì)胞
營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板/普通肉湯瓊脂平板/Nutrient Agar Plate一般細(xì)菌的培養(yǎng)和細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定50塊國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
RL95-2(人子宮內(nèi)膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SW626(人卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SOB瓊脂/SOB AgarBR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
塔那痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌CNTFR-α 睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α抗體 0.1ml
VRK1 牛痘病毒相關(guān)激酶1抗體(絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶VRK1) 0.2ml
phospho-Bcl-xL/BCL2L1(Thr115) 磷酸化Bcl-xL蛋白抗體 0.1ml
phospho-TIRAP(Tyr86) 磷酸化白細(xì)胞介素1受體銜接蛋白抗體 0.1ml
Mesothelioma 間質(zhì)細(xì)胞蛋白抗體 0.2ml
HMGB1 高遷移率族蛋白B1抗體 0.1ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
CK2 細(xì)胞角蛋白2抗體 0.1ml
AMIGO3 粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 0.2ml
CCR10 細(xì)胞表面趨化因子受體10抗體 0.1ml
GLMN/FK506 binding protein associated protein FK506結(jié)合蛋白相關(guān)蛋白抗體(他克莫司相關(guān)蛋白) 0.2ml
Phospho-Histone H3 (Ser10) 磷酸化組蛋白H3抗體 0.1ml