詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
泰勒屬原蟲通用PCR檢測試劑盒多少錢參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
泰勒屬原蟲通用PCR檢測試劑盒多少錢 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
泰勒屬原蟲通用PCR檢測試劑盒多少錢15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
NCI-H524(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
P19(小鼠畸胎瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
Ishikawa(人子宮內(nèi)膜細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MDA-MB-231(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
LS-174T(人結(jié)腸腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HFL1(人肺成纖維細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
786-O(人腎透明細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
COLO 320(人結(jié)腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠淋巴瘤細(xì)胞英文名稱:EL4
A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細(xì)胞株
神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞英文名稱:CRT
泰勒屬原蟲通用PCR檢測試劑盒多少錢NSP5 核結(jié)構(gòu)蛋白5抗體 0.2ml
Rabbit Anti-human IgM/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
Goat Anti-Mouse IgG/PE PE標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
SLC27A1 長鏈脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 0.2ml
TYRO3/MER+SKY 受體酪氨酸激酶抗體 0.2ml
CNO/Cappuccino Cappuccino蛋白抗體 0.2ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml
Goat Anti-human IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的羊抗人IgG 0.1ml
CSIG 細(xì)胞衰老抑制基因抗體 0.2ml
Phospho-PLC gamma 1(Ser1248) 磷酸化磷酯酶Cγ1抗體 0.1ml
CDK10 周期素依賴性激酶10 0.2ml
DIS/CCAR1 細(xì)胞周期及凋亡調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.2ml