詳細介紹
木絲霉PCR檢測試劑盒品牌使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
木絲霉PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品:
木絲霉PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
乙環(huán)唑分子式:328.19分子量: C14H15Cl2N3O2英文名稱:Ethylene loopCAS號:60207-93-4
5-喹啉分子式:144.17分子量: C9H8N2英文名稱:5- amino groupCAS號:611-34-7
愈創(chuàng)木酚英文名稱:GuaiacolCAS號:32994分子式:124.13分子量: C7H8O2
2,4-二硝氟分子式:186.1分子量: C6H3FN2O4英文名稱:2,4- two FluoronitrobenzeneCAS號:70-34-8
2-溴噻唑分子式:164.02分子量: C3H2BrNS英文名稱:2- thiazole bromideCAS號:3034-53-5
十九英文名稱:Nineteen acidCAS號:646-30-0分子式:298.5分子量: C19H38O2
4,6-二羥-5-甲氧嘧分子式:142.11分子量: C5H6N2O3英文名稱:4,6- two hydroxy -5-CAS號:5193-84-0
酞菁錫(II)英文名稱:Tin phthalocyanine (II)CAS號:15304-57-1分子式:631.25分子量: C32H16N8Sn
堿性品綠英文名稱:Basic greenCAS號:569-64-2分子式:364.91分子量: C23H25ClN2
五味子甲英文名稱:The fruit of FructusCAS號:58546-54-6分子式:416.46422分子量:C23H28O7
6-溴喹啉分子式:208.06分子量: C9H6BrN英文名稱:6- bromideCAS號:5332-25-2
木絲霉PCR檢測試劑盒品牌SDHA 琥珀酸脫氫酶復(fù)合體亞基A抗體 0.2ml
phospho-CDKN1B/P27kip1 (Ser10) 磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑 0.1ml
Phospho-Stathmin (Ser16) 磷酸化原癌基因蛋白18抗體 0.1ml
Acetyl-Histone H2A(K5) 乙酰化組蛋白H2A抗體 0.1ml
Rab25 癌基因RAS相關(guān)蛋白Rab25抗體 0.2ml
phgophs-ATG4C(Ser451) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體 0.1ml
Galc 半乳糖腦苷脂酶抗體 0.1ml
CRF/CRH 促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子抗體 0.1ml
DEK DEK癌基因結(jié)合蛋白 0.1ml
NT-4/NT-5 神經(jīng)生長因子4/5抗體 0.1ml
IL-6 (NT) 白介素6抗體(N端) 0.1ml
GDNF 膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體 0.1ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。