詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
假結(jié)核耶爾森菌PCR檢測試劑盒品牌參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
假結(jié)核耶爾森菌PCR檢測試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
假結(jié)核耶爾森菌PCR檢測試劑盒品牌15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
4-羥甲-4'-甲-2,2'-聯(lián)吡分子式:200.24分子量: C12H12N2O英文名稱:4-, -4'-, -2,2'-CAS號(hào):81998-04-1
瑞氏色素/瑞氏染色液英文名稱:Red pigment / Wright's stainCAS號(hào):68988-92-1分子式:分子量: C36H27N3O5Br4
5-溴噻唑分子式:164.02分子量: C3H2BrNS英文名稱:5- thiazole bromideCAS號(hào):3034-55-7
8-氯喹啉分子式:163.61分子量: C9H6ClN英文名稱:8- chlorideCAS號(hào):611-33-6
鉀分子式:786.4分子量: HgI4K2英文名稱:Potassium mercuric iodideCAS號(hào):7783-33-7
大豆皂苷AA英文名稱:Soybean saponin AACAS號(hào):117230-33-8分子式:1365.46分子量:C64 H100 O31
氘代溴分子式:162.04分子量: C6BrD5英文名稱:Deuterated bromobenzeneCAS號(hào):4165-57-5
2-溴-3-三氟甲吡分子式:226分子量: C6H3BrF3N英文名稱:2- three -3-CAS號(hào):175205-82-0
直接凍黃G英文名稱:Direct frozen yellow GCAS號(hào):2870-32-8分子式:680.66分子量: C30H26N4Na2O8S
1-戊咪唑分子式:138.21分子量: C8H14N2英文名稱:1- methyl imidazoleCAS號(hào):
并噻吩砜分子式:166.2分子量: C8H6O2S英文名稱:Benzene and thiopheneCAS號(hào):825-44-5
假結(jié)核耶爾森菌PCR檢測試劑盒品牌phospho-Tau protein(Ser262) 磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
PDX1 胰島素促進(jìn)因子抗體(胰十二指腸同源異型盒蛋白) 0.1ml
RAP2B 原癌基因相關(guān)蛋白R(shí)AP2B抗體 0.2ml
A Raf/ARAF A-Raf抗體 0.1ml
GABRA5/GABA A Receptor alpha 5 γ1氨基受體α5/GABRα5抗體 0.1ml
C11ORF16 11號(hào)染色體開放閱讀框16抗體 0.2ml
FSTL1/FRP 卵泡相關(guān)蛋白1 0.1ml
RNF158 心臟蛋酸酶1結(jié)合蛋白/環(huán)指蛋白158抗體 0.2ml
phospho-STAT6(Thr645) 磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體 0.1ml
SEK1/MKK4 絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體 0.2ml
Integrin alpha L/CD11a 整合素αL抗體 0.1ml
HA tag(12CA5) HA tag標(biāo)簽單克隆抗體 0.1ml