詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
新城疫病毒(NDV)核酸檢測(cè)試劑盒圖片多少錢參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
新城疫病毒(NDV)核酸檢測(cè)試劑盒圖片多少錢 | 48T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
自備物品:
新城疫病毒(NDV)核酸檢測(cè)試劑盒圖片多少錢15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
1-萘乙英文名稱:1- NAACAS號(hào):86-87-3分子式:186.21分子量: C12H10O2
溴-1-十六烷-3-甲咪唑分子式:387.44分子量: C20H39BrN2英文名稱:-1- sixteen alkyl -3-CAS號(hào):
3,3,4,4-四氯環(huán)丁砜分子式:257.951分子量: C4H4Cl4O2S英文名稱:3,3,4,4- four chlorine SulfolaneCAS號(hào):3737-41-5
4-巰吡分子式:111.16分子量: C5H5NS英文名稱:4- thiolCAS號(hào):4556-23-4
(S)-(-)-4,4'-雙(二膦)-3,3'-二(1,2-亞甲二氧)分子式:610.59分子量: C38H28O4P2英文名稱:(S) - (-) -4,4'- bis (two 1,2-) -3,3'- two (two)CAS號(hào):210169-54-3
1-二十八烷英文名稱:1- twenty-eight alkyl alcoholCAS號(hào):67905-27-5分子式:410.75952分子量:C28H58O
番瀉苷C英文名稱:The CCAS號(hào):71-16-2分子式:848.77分子量:C42H40O19
二水醛縮乙二胺鈷分子式:325.23分子量: C16H14CoN2O2英文名稱:Two salicylaldehyde ethylenediamine cobaltCAS號(hào):14167-18-1
硫長(zhǎng)春堿英文名稱:Changchun sulfateCAS號(hào):143-67-9分子式:909.05分子量:C46H58N4O9·H2SO4
O,O'-雙(*硅烷)-5-氟尿嘧分子式:274.44分子量: C10H19FN2O2Si2英文名稱:O, O'- bis (three methyl silane) -5-CAS號(hào):17242-85-2
3-甲-4-硝吡唑分子式:127.1分子量: C4H5N3O2英文名稱:3- methyl -4-CAS號(hào):5334-39-4
新城疫病毒(NDV)核酸檢測(cè)試劑盒圖片多少錢FASN/Fatty Acid Synthase 1 脂肪酸合成酶抗體 0.1ml
SRXN1 硫氧還蛋白1抗體 0.2ml
Caspase-9 白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體 0.1ml
S100A13 S100A13抗體 0.1ml
phospho-CDKN1B/P27kip1 (Thr198) 磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體 0.1ml
Phospho-LAT (Tyr171) 磷酸化T細(xì)胞活化連接蛋白抗體 0.1ml
KRAS 原癌基因K-ras抗體 0.1ml
phospho-SYN1(Ser62+Ser67) 磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體 0.1ml
Collagen VII 7型膠原抗體 0.1ml
Dnmt3a DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α抗體 0.2ml
CNKSR3 Ras激酶抑制因子連接增強(qiáng)蛋白3抗體 0.2ml
Integrin β2/CD18/LFA-1 整合素β2抗體 0.1ml