詳細(xì)介紹
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、百日咳桿菌(BP)核酸檢測(cè)試劑盒方法樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
百日咳桿菌(BP)核酸檢測(cè)試劑盒方法 | 48T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
反應(yīng)五要素:
百日咳桿菌(BP)核酸檢測(cè)試劑盒方法參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
酞菁銀(I)英文名稱:Phthalocyanine silver (I)CAS號(hào):12376-32-8分子式:728.27分子量: C32H16Ag2N8
萘[2,3-a]芘分子式:302.38分子量: C24H14英文名稱:Naphthalene [2,3-a] pyreneCAS號(hào):196-42-9
2-氯-6-硝甲分子式:171.58分子量: C7H6ClNO2英文名稱:2- -6- nitro tolueneCAS號(hào):83-42-1
葉菌唑分子式:319.83分子量: C17H22ClN3O英文名稱:Ye JunzuoCAS號(hào):125116-23-6
2,6-雙(2-并咪唑)吡分子式:311.35分子量: C19H13N5英文名稱:Double 2,6- (2- benzimidazole) pyridineCAS號(hào):28020-73-7
(2B油)鄰氯對(duì)甲分子式:141.6分子量: C7H8ClN; ClC6H3(CH3)NH2英文名稱:(2B) ortho chlorine to amino tolueneCAS號(hào):95-74-9
十三烷分子式:260.46分子量: C19H32英文名稱:Thirteen benzeneCAS號(hào):123-02-4
3,3',5,5'-四甲聯(lián)分子式:210.32分子量: C16H18英文名稱:3,3', 5,5'- fourCAS號(hào):25570-02-9
乙炔對(duì)甲砜分子式:180.22分子量: C9H8O2S英文名稱:Acetylene based on tolueneCAS號(hào):13894-21-8
二氫尿嘧分子式:114.1分子量: C4H6N2O2英文名稱:Two hydrogen uracilCAS號(hào):504-07-4
溴亞酮分子式:205.58分子量: C2H6BrCuS英文名稱:溴亞酮CAS號(hào):54678-23-8
百日咳桿菌(BP)核酸檢測(cè)試劑盒方法Ankyrin G 錨定蛋白G抗體 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml
RHBDD3 垂體瘤細(xì)胞凋亡抗體 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.3ml
Reg3 gamma 胰島β細(xì)胞生長(zhǎng)因子Reg IIIγ抗體 0.2ml
SYN1 神經(jīng)突觸素1抗體 0.1ml
Goat anti-Mouse IgM whole serum 羊抗小鼠IgM抗血清 1ml
ROC1/RNF75 環(huán)指蛋白75抗體 0.2ml
Collagen IV/Arresten 抗IV型膠原抗體 0.1ml
NEK1 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶NEK1抗體 0.2ml
C5b-9 末端補(bǔ)體復(fù)合物抗體 0.2ml
IL-10 白細(xì)胞介素-10抗體 0.1ml