詳細(xì)介紹
人細(xì)小病毒(B19)核酸檢測(cè)試劑盒方法使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
人細(xì)小病毒(B19)核酸檢測(cè)試劑盒方法 | 48T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
人細(xì)小病毒(B19)核酸檢測(cè)試劑盒方法15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
噻蟲啉分子式:252.72分子量: C10H9ClN4S英文名稱:Insect pestCAS號(hào):111988-49-9
1-酰異喹啉分子式:233.26分子量: C16H11NO英文名稱:1- phenyl groupCAS號(hào):16576-23-1
亞硝鈷鈉英文名稱:Sodium nitriteCAS號(hào):13600-98-1分子式:403.94分子量: CoN6Na3O12
冬凌草甲素英文名稱:OridoninCAS號(hào):28957-04-2分子式:364.43272分子量:C20H28O6
乙-乙銨緩沖溶液英文名稱:Acetic acid ammonium acetate buffer solutionCAS號(hào):分子式:分子量:
2-萘分子式:158.2分子量: C10H10N2英文名稱:2- naphthalene hydrazineCAS號(hào):2243-57-4
奧沙利鉑英文名稱:OxaliplatinCAS號(hào):63121-00-6分子式: 397.3 g/mol分子量: C8H14N2O4Pt
三氟甲分子式:146.11分子量: C7H5F3英文名稱:Three fluorine tolueneCAS號(hào):36015
性黃RN英文名稱:Acid yellow RNCAS號(hào):6359-85-9分子式:549.55457分子量: C23H20N5NaO6S2
2-氯-7-甲喹啉分子式:177.5分子量: C10H8ClN英文名稱:2- -7- methyl groupCAS號(hào):875100
4-分子式:100.16分子量: C5H12N2英文名稱:Aminopiperidine 4-CAS號(hào):13035-19-3
人細(xì)小病毒(B19)核酸檢測(cè)試劑盒方法Histone H4 組蛋白H4抗體 0.1ml
Rabbit Anti-human IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
Goat Anti-Mouse IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
Snake poison Protein 蛇毒蛋白抗體(中華眼鏡蛇) 0.2ml
EHZF/ZN521 鋅指蛋白521抗體 0.1ml
LCA5L 致盲基因LCA5樣蛋白抗體 0.2ml
POU6F2 轉(zhuǎn)錄因子RPF1抗體 0.2ml
MURF3 肌肉特異性環(huán)指蛋白3抗體 0.2ml
FAF1 Fas相關(guān)1因子抗體 0.1ml
ANKRD54 錨蛋白重復(fù)域54抗體 0.2ml
Robo 軸突導(dǎo)向受體抗體 0.1ml
phospho-PTPN6(Ser591) 磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗體 0.1ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。