詳細介紹
反應五要素:
肉毒桿菌(A/B型)核酸檢測試劑盒圖片參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
肉毒桿菌(A/B型)核酸檢測試劑盒圖片 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應不超過72h,-70℃以下可長期保存,但應避免反復凍融(zui多凍融3次);
3、運輸:采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應流程:
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自備物品:
肉毒桿菌(A/B型)核酸檢測試劑盒圖片15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件:
14℃或-20℃
準備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
氯唑H英文名稱:Black BHCAS號:2429-73-4分子式:830.71分子量: C32H21N6Na3O11S3
2,4-二氟硝分子式:159.09分子量: C6H3F2NO2英文名稱:2,4- twoCAS號:446-35-5
1-異喹啉分子式:255.06分子量: C9H6IN英文名稱:1- iodideCAS號:19658-77-6
磷酸二氫鉀分子式:136.09分子量: KH2PO4英文名稱:Potassium dihydrogen phosphateCAS號:7778-77-0
白術內(nèi)酯III英文名稱:Atractylenolide IIICAS號:73030-71-4分子式:248.3175分子量:C15H20O3
四溴-2-(三正丁錫)噻唑分子式:分子量: C15H28BrNSSn英文名稱:Four - 2 - (tributylstannyl) thiazoleCAS號:173978-98-8
甲分子式:46.07分子量: CH6N2英文名稱:Methyl hydrazineCAS號:60-34-4
6-羥喹啉分子式:145.16分子量: C9H7NO英文名稱:6- hydroxy groupCAS號:580-16-5
3,4-二分子式:232.06分子量: C8H9I英文名稱:3,4- two methyl iodophenylCAS號:31599-61-8
1-(1-甲-4-)嗪分子式:183.29分子量: C10H21N3英文名稱:1- (1- methyl piperidine based -4-) piperazineCAS號:23995-88-2
5-甲氧-2-甲并硒唑分子式:226.14分子量: C9H9NOSe英文名稱:5- methyl group -2- methyl benzene and seleniumCAS號:2946-17-0
肉毒桿菌(A/B型)核酸檢測試劑盒圖片ENPP2 核苷酸焦磷酸酶2抗體 0.2ml
TSPAN10/Oculospanin 四分子交聯(lián)體10抗體(四旋蛋白) 0.2ml
phospho-NF1(Ser2817) 磷酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體 0.1ml
Phospho-Jak3 (Tyr785) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體 0.1ml
V.cholera Ogawa 01稻葉型霍亂弧菌抗體 0.2ml
KMT1A/SUV39H1 組蛋白H3 K9甲基轉(zhuǎn)移酶抗體 0.2ml
BAG3 Bcl2抑凋亡蛋白Bag3抗體 0.2ml
STMN3 原癌基因18家族STMN3蛋白抗體 0.1ml
C3orf23 3號染色體開放閱讀框23抗體 0.2ml
C3a/C3a anaphylatoxin 補體C3a過敏毒素抗體 0.1ml
KMT1C/G9a 組蛋白H3賴氨酸9甲基化1C抗體 0.2ml
phospho-c-Jun(Thr91+Thr93) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體 0.1ml