蟹特定基因序列（Cytb）核酸檢測(cè)試劑盒方法是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:

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使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	分類
蟹特定基因序列(Cytb)核酸檢測(cè)試劑盒方法	48T	PCR檢測(cè)試劑盒

自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

1-乙酰咪唑分子式：110.11分子量： C5H6N2O英文名稱：1- acetylCAS號(hào)：2466-76-4

鄰二氯分子式：147分子量： C6H4Cl2英文名稱：Adjacent twoCAS號(hào)：95-50-1

酒石酸銻鉀分子式：667.87分子量： C8H10K2O15Sb2英文名稱：Antimony potassium antimonyCAS號(hào)：28300-74-5

5-硝水醛英文名稱：5- nitro groupCAS號(hào)：97-51-8分子式：167.12分子量： C7H5NO4

1,3-雙(4-甲氧氧)分子式：322.36分子量： C20H18O4英文名稱：1,3- bis (4-) benzeneCAS號(hào)：13118-91-7

曙紅B英文名稱：Eosin BCAS號(hào)：548-24-3分子式：624.06分子量： C20H6N2O9Br2Na2

二甲酚藍(lán)英文名稱：Xylene phenol blueCAS號(hào)：125-31-5分子式：410.48分子量： C23H22O5S

2-氯-5-氟硝分子式：175.54分子量： C6H3ClFNO2英文名稱：2- chloride -5-CAS號(hào)：345-17-5

2-(2-噻吩)吡分子式：161.22分子量： C9H7NS英文名稱：2- (2-) pyridineCAS號(hào)：3319-99-1

4-二甲吡(DMAP)分子式：122.17分子量： C7H10N2英文名稱：4- two (DMAP)CAS號(hào)：1122-58-3

4-甲酸分子式：129.16分子量： C6H11NO2英文名稱：4- piperidine formic acidCAS號(hào)：498-94-2

蟹特定基因序列(Cytb)核酸檢測(cè)試劑盒方法phospho-MEK5(Ser142)  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體 0.1ml

Integrin alpha E2  整合素alpha E2 抗體 0.1ml

DHPS  脫氧輔合酶蛋白抗體 0.2ml

phospho C-Met/HGFR(Tyr1365)  磷酸化原癌基因c-Met抗體 0.1ml

BS69/Adenovirus 5 E1A binding protein  腺病毒5結(jié)合蛋白BS69抗體(骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體相關(guān)分子1) 0.2ml

Phospho-Rb(Ser788)  磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml

BTBD17  BTB/POZ結(jié)構(gòu)域蛋白17抗體 0.2ml

IL-17B  白介素-17B抗體 0.1ml

SA1/Nuclear protein stromal antigen 1  粘結(jié)蛋白SA1抗體 0.2ml

BAFF/CD257  TNF家族B細(xì)胞激活因子抗體 0.2ml

PRX/periaxin  軸周蛋白PRX抗體 0.1ml

DOK6  胞漿接頭蛋白Dok6抗體 0.2ml