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詳細介紹
反應(yīng)五要素:
豬流行性腹瀉病毒(PEDV)核酸檢測試劑盒圖片參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
豬流行性腹瀉病毒(PEDV)核酸檢測試劑盒圖片 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
豬流行性腹瀉病毒(PEDV)核酸檢測試劑盒圖片15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準備物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀釋液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
氘代-d6分子式：84.15分子量： C6D6英文名稱：Deuterium substituted benzene -d6CAS號：1076-43-3
1-溴-3-(五氟磺酰)分子式：283.06分子量： C6H4BrF5S英文名稱：1- -3- (five f) benzeneCAS號：672-30-0
3-溴-6-羥-2-甲吡分子式：188.02分子量： C6H6BrNO英文名稱：3- -6- hydroxy -2- methyl pyridineCAS號：54923-31-8
1-Boc-4-分子式：311.16分子量： C10H18INO2英文名稱：1-Boc-4- iodine piperidineCAS號：301673-14-3
2-二氟甲溴分子式：分子量： C7H5BrF2英文名稱：2- two - methyl fluorideCAS號：845866-82-2
亞硝紅鹽英文名稱：Nitroso R saltCAS號：525-05-3分子式：377.26分子量： C10H5NNa2O8S2；ONC1
7-溴-1-羥異喹啉分子式：224.05分子量： C9H6BrNO英文名稱：7- -1- hydroxy ISOCAS號：223671-15-6
2,4-二羥甲英文名稱：2,4- two hydroxy benzoic acidCAS號：89-86-1分子式：154.12分子量： C7H6O4
對偶氮分子式：197.24分子量： C12H11N3英文名稱：P-aminoazobenzeneCAS號：22162
托曲珠利英文名稱：ToltrazurilCAS號：69004-03-1分子式：425.38分子量： C18H14F3N3O4S
二并噻吩砜分子式：216.26分子量： C12H8O2S英文名稱：Two benzene and thiopheneCAS號：1016-05-3
FSIP1 纖維性鞘結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
CYP11A1/P450SCC 細胞色素P450 11A1抗體 0.1ml
BMP11 骨形態(tài)發(fā)生蛋白11抗體 0.2ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/PE PE標記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml
Rabbit Anti-Biotin/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的兔抗生物素抗體IgG 0.1ml
Tubb3/Tubulin beta 3 微管蛋白β3抗體 0.1ml
SM-MHC 心肌肌球蛋白抗體（α-myosin） 0.1ml
LRCH2 富含亮氨酸重復(fù)家庭蛋白2抗體 0.2ml
phospho-eIF4G(ser1108) 磷酸化真核翻譯起始因子4G抗體 0.1ml
DCUN1D4 DCUN1D4蛋白抗體 0.2ml
phospho-VAV3(Tyr173) 磷酸化鳥嘌呤核苷酸交換因子VAV3抗體 0.1ml
ZHX2/Alpha fetoprotein regulator 1 甲胎蛋白調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.2ml
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