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技術(shù)文章

大鼠脫氫表雄酮elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟

閱讀:104          發(fā)布時(shí)間:2023-2-16

大鼠脫氫表雄酮elisa檢測(cè)試劑盒操作步驟:


1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

月桂酸;十二烷酸Lauric Acid143-07-7

L-肌肽;L-肉縮氨基酸;β-丙氨酰-L-組氨酸L-Carnosine;Ignotine305-84-0

L-瓜氨酸L-Citrulline372-75-8

黃色氧化鉛;一氧化鉛;密陀僧;黃丹Lead Monoxide;Lead(II)oxide1317-36-8

紅色氧化鉛;四氧化三鉛;鉛丹;紅丹;氧化鉛Lead(II,IV)oxide;MiniuM1314-41-6

隱色孔雀綠LEUCOMALACHITE GREEN129-73-7

左氧氟沙星相關(guān)物質(zhì)ALevofloxacin Related CoMpound A;(S)-9-fluro-3-Methyl-10-(piperazin-1-yl)-7-oxo-2,3-dihydro-7H-pyrido[1,2,3-de][1,4]benzoxazine-6-carboxylic acid117707-40-1

左氧氟沙星相關(guān)物質(zhì)BLevofloxacin Related CoMpound B;(S)-9,10,difluro-3-Methyl-7-oxo-2,3-dihydro-7H-pyrido[1,2,3-de][1,4]benzoxazine-6-carboxylic acid100986-89-8

L-谷氨酸二乙酯鹽酸鹽L-GlutaMic acid diethyl ester hydrochloride;Diethyl L-glutaMate hydrochloride1118-89-4

L-谷氨酸;L-麩氨酸;L-α-氨基戊二酸L-GlutaMic acid;(S)-2-AMinoglutaric acid56-86-0

L-組氨酸L-Histidine71-00-1

L-高精氨酸鹽酸鹽L-HoMoarginine hydrochloride;(S)-2-AMi-no-6-guanidinohe-xanoic acid hydrochloride1483-01-8

LiChroCART@250-4

芳樟醇;里那醇;沉香醇;芫荽醇;沉香萜醇;伽羅木醇;胡荽醇;3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇Linalool;3,7-DiMethyl-1,6-octadien-3-ol;2,6-DiMethyl-2,7-octadien-6-ol78-70-6

硼氫化鋰;四氫硼鋰;氫硼化鋰LithiuM borohydride;16949-15-8

氯化鋰;一水合氯化鋰LithiuM chloride Monohydrate85144-11-2



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