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血清實(shí)驗(yàn)時(shí)使用方法說(shuō)明
閱讀：157 發(fā)布時(shí)間：2017-5-23| 提 供 商 | 上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 12.2KB |
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1、存放血清的辦法?
血清應(yīng)保存在-20℃以下。若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過(guò)半個(gè)月。
2、如何解凍血清才不會(huì)使質(zhì)量受損?
血清從冷凍箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融，溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。
3、如何處理血清解凍后出現(xiàn)的絮狀沉淀物?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因，但主要原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成。血纖素蛋白(形成凝血的蛋白之一)也是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物并不影響血清本身的質(zhì)量。若欲去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi)，稍微離心，上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物會(huì)導(dǎo)致過(guò)濾膜的阻塞。
4、為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。激活的補(bǔ)體將會(huì)參與有關(guān)細(xì)胞的溶解過(guò)程，刺激平滑肌收縮、細(xì)胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。建議在培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲(chóng)細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí)，使用熱滅活血清。
5、有必要做熱滅活嗎?
大多數(shù)細(xì)胞的培養(yǎng)不需要經(jīng)過(guò)熱滅活處理的血清。熱滅活血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn)或*沒(méi)有任何作用，甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓幕钚裕斐杉?xì)胞生長(zhǎng)速度的降低。同時(shí)經(jīng)過(guò)熱處理的血清，沉淀物的形成會(huì)顯著的增多，這些沉淀物會(huì)讓使用者誤以為是微生物的污染。若非必須，可以不需要做熱處理這一步，不但節(jié)省時(shí)間，更確保血清的質(zhì)量。
6、如何避免沉淀物的產(chǎn)生?
建議在使用血清的時(shí)候，注意下列的操作：
(1)解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37 ℃)，非常容易產(chǎn)生沉淀物。
(2) 解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
(3)請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
(4) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多。若非必要,可以無(wú)須進(jìn)行熱滅活處理。
(5) 若必須做血清的熱滅活,應(yīng)嚴(yán)格控制56℃熱處理30分鐘,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高、時(shí)間過(guò)久以及搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。