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詳細(xì)介紹
商品介紹：
本產(chǎn)品主要適用于動(dòng)物原生代或培養(yǎng)細(xì)胞的鈣沉積和鈣化結(jié)節(jié)檢測(cè)。廣泛用于骨細(xì)胞或組織病理生理的研究。 茜素紅S 是一種蒽醌衍生物：9,10-二氫-3,4-二羥基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸單鈉鹽，又稱媒介紅3（Mordant Red3）或茜素磺酸鈉。其分子式為C14H7NaO7S，分子量為342.25。茜素紅和鈣離子以鰲和方式形成復(fù)合物，用以識(shí)別組織細(xì)胞的鈣鹽成分。鈣鹽變化是骨細(xì)胞增殖分化和骨組織成骨潛能的標(biāo)志之一。通過(guò)茜紅素染色，產(chǎn)生桔紅色沉積，但會(huì)受到其它金屬元素的干擾。 注意： 1.臨用前將茜素紅染色液B 以超純水稀釋十倍，待用（通風(fēng)櫥內(nèi)操作）。 2.將9mL 茜素紅S 染色液A 與1mL 稀釋后的茜素紅染色液B *混合，即得到1%的茜素紅S 染色工作液，pH6.3 左右。制備好的染色工作液在2-8℃，避光條件下可保存1 月。 3.以6 孔板為例，每孔孵育的染色工作液為500μL，本試劑盒可以做20tests；以普通切片和96 孔細(xì)胞為例，每張玻片孵育的染色工作液為100μL，本試劑盒可以做100tests。 儲(chǔ)存：2～8℃，有效期3個(gè)月。 |
產(chǎn)品屬性：
中文名稱：茜素紅染色液(ph4.2)
英文名稱：
產(chǎn)品規(guī)格：10ml
發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；
②生物膜與細(xì)胞器的研究；
③細(xì)胞骨架體系的研究；
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
右佐匹克（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (R)-(?)-Mandelic acid雌激受體α抗體包裝250mg
魚腥草鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1-Aminohydantoin Hydrochloride內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Aβ相關(guān)結(jié)合蛋白抗體包裝1g
愈創(chuàng)甘油（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 1-Aminohydantoin HydrochlorideEphrin A2抗體包裝5g
愈創(chuàng)木酚磺（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ACTH (1-24), human大腸埃希菌菌體蛋白抗體包裝1g
遠(yuǎn)華蟾蜍精(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Bradykinin雌激硫轉(zhuǎn)移抗體包裝25g
月桂（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Bradykinin acetateE Tag標(biāo)簽抗體包裝5g
孕三烯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： α-MSH登革熱病包膜糖蛋白E抗體包裝25g
扎來(lái)普（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Endothelin-1, human,porcine食道癌相關(guān)基因抗體包裝5g
扎那米韋(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： BombesinEB病核抗原-3A抗體包裝500g
扎托布洛芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： VIP, human, porcine, rat; VIP (28 amino acids)膠質(zhì)谷運(yùn)載蛋白1抗體包裝1g
正己（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Agarose轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體包裝5g
正十九烷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： PEG 400內(nèi)皮轉(zhuǎn)化1抗體包裝1mg
正十五烷（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cholestyramine resin外基質(zhì)蛋白1抗體包裝5mg
芝麻酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sucrose外胚層發(fā)育不良抗體包裝25g
酯蟾配基；蟾力蘇(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： D-(+)-Trehalose, dihydrate E2 tag標(biāo)簽抗體包裝5g
伊尼奧小單孢菌澄江變種Micromonospora│inyoensis var. dengjiangensis 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品糖化血紅蛋白A1c試劑盒3,4,5-三氧基酯;Meth
卷曲乳桿菌Lactobacillus│crispatus 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR糖化低密度脂蛋白試劑盒石杉?jí)A;(-)-Huperzine A
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品糖化白蛋白試劑盒楊酯;Birch-Me
茜素紅染色液(ph4.2)朱黃籃狀 FMOC-D-1,2,3,4-四氫-Β-咔啉-3-羧酸β2巨球蛋白Elisa
Paenibacillus durus 2,3,7,8,12,13,17,18-八乙基-21H,23H-卟吩α-烯化Elisa
解脂假絲酵母 3-氨基-2,2-二甲基-1-(草酸鹽形式）α-烯化Elisa
加德納 8-苯基辛酸胸腺表達(dá)趨化因子Elisa
長(zhǎng)蠕孢 N-(4-溴苯基)硫脲再生胰島衍生蛋白4Elisa
褐囊蜜環(huán) N-3-異惡唑氨酸叔丁酯p物質(zhì)前提Elisa
野土地桿 5-溴-2-呋喃甲酰肼EB病包膜糖蛋白gp350抗體Elisa
釀酒酵母 4-硝基馬尿酸MG29抗體Elisa
不產(chǎn)色鏈霉不產(chǎn)色亞種 4-氨基鄰甲酚組釋放因子Elisa
釀酒酵母 2-溴-1,3-二氯-5-氟苯磷酸化肝生長(zhǎng)因子受體Elisa
噬果膠黃桿 3--1,2,3-三羧酸map2k5Elisa
地衣芽孢桿 3-氧雜環(huán)丁烷支原體IgG抗體Elisa
康寧木霉 3-二氟甲氧基衣原體抗體IgGElisa
相思根瘤 4-甲氧基-2-乙肺炎支原體IgM抗體Elisa
膨端青霉 2,4-二羥基-3-硝基吡啶肌抗體Elisa
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