詳細(xì)介紹
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-560生長(zhǎng)特性注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶(hù)自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類(lèi)齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人宮頸癌細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿(mǎn),光澤度好,*,專(zhuān)業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類(lèi)產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶(hù)!
細(xì)胞名稱(chēng) Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-560生長(zhǎng)特性
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使SK-OV-3細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:2~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:11,11;D12S391:22,22;D13S317:8,11;D16S539:12,12;D18S51:16,17;D19S433:14,14.2;D21S11:30,31.2;D2S1338:18,23;D3S1358:14,14;D5S818:11,11;D6S1043:12,12;D7S820:13,13;D8S1179:14,15;FGA:24,25;Penta E:5,13;TH01:9,9.3;TPOX:8,11;vWA:18,18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類(lèi)
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-560生長(zhǎng)特性復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿(mǎn)37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
結(jié)晶紫分子式:407.98分子量:C25H30N3Cl英文名稱(chēng):CrystalvioletCAS號(hào):548-62-9
2,5-二甲氧-4-氯嘧啶英文名稱(chēng):2,5-twoa-4-CAS號(hào):370103-25-6分子式:分子量:
1,4-雙(2,2,2-三氟乙氧)英文名稱(chēng):1,4-bis(2,2,2-three)CAS號(hào):66300-61-6分子式:274.16分子量:C10H8F6O2
4,4'-二壬-2,2'-聯(lián)吡啶英文名稱(chēng):4,4'-twononyl-2,2'-bipyridineCAS號(hào):142646-58-0分子式:408.67分子量:C28H44N2
1-(氯()甲)-2-甲英文名稱(chēng):1-(chloride(BenJi)methyl)-2-methylbenzeneCAS號(hào):41870-52-4分子式:216.71分子量:C14H13Cl
4-羥喹唑啉英文名稱(chēng):4-hydroxygroupCAS號(hào):491-36-1分子式:146.15分子量:C8H6N2O
1--3-甲-5-吡唑英文名稱(chēng):1-phenyl-3-methyl-5-CAS號(hào):1131-18-6分子式:173分子量:C10H11N3
溴酸鉀英文名稱(chēng):PotassiumbromateCAS號(hào):7758/1/2分子式:167分子量:KBrO3
4-碘1H-咪唑英文名稱(chēng):4碘1H-咪唑CAS號(hào):71759-89-2分子式:193.97分子量:C3H3IN2
硫酸鋁英文名稱(chēng):AluminiumsulfateCAS號(hào):7784-31-8分子式:666.43分子量:Al2(SO4)3·18H2O
7--2-并惡唑啉酮英文名稱(chēng):7--2--benzoxazoloneCAS號(hào):81282-60-2分子式:150.14分子量:C7H6N2O2
對(duì)羥甲分子式:138.12分子量:C7H6O3英文名稱(chēng):ParahydroxybenzoicacidCAS號(hào):99-96-7
2-羥吡啶英文名稱(chēng):2-hydroxypyridineCAS號(hào):142-08-5分子式:95.1分子量:C5H5NO
2-氯-3,5-二硝三氟甲英文名稱(chēng):2--3,5-twonitrothreefCAS號(hào):392-95-0分子式:270.55分子量:C7H2ClF3N2O4
2-溴-5-硝吡啶英文名稱(chēng):2--5-nitropyridineCAS號(hào):24487-59-6分子式:202.99分子量:C5H5BrN2
2-溴聯(lián)英文名稱(chēng):2-bromideCAS號(hào):2052/7/5分子式:233.1分子量:C12H9Br
3-溴-5-甲氧吡啶英文名稱(chēng):3-bromide-5-aCAS號(hào):50720-12-2分子式:188.02分子量:C6H6BrNO MDA-MB-453(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HIC(人小腸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
A673(人橫紋肌瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CRFK(貓腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
A549/DDP, 人肺腺耐藥細(xì)胞株
食管鱗英文名稱(chēng):KYSE150
5%糖發(fā)酵管/5% Lactose Ferment Broth糖遲發(fā)酵菌種的鑒別250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
PLET瓊脂基礎(chǔ)/多粘菌素B溶菌酶乙二胺四乙酸乙酸亞瓊脂基礎(chǔ)/PLET Agar Base炭疽桿菌的分離鑒別250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人回盲腸細(xì)胞英文名稱(chēng):HCT-8
改良SKIRROW氏瓊脂基礎(chǔ)/空腸彎曲菌瓊脂基礎(chǔ)/Skirrow Agar Base Modified用于空腸彎曲菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
RIN-m5f(大鼠胰島β細(xì)胞瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2gersion
小鼠骨髓瘤細(xì)胞英文名稱(chēng):FO
酸性L-G培養(yǎng)基基礎(chǔ)/Acid L-G medium Base堿性物質(zhì)處理的結(jié)核桿菌標(biāo)本250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人肝竇內(nèi)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
哥倫比亞MUG培養(yǎng)基/哥倫比亞4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養(yǎng)基/Columbia-MUG Medium大腸桿菌的熒光檢測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
俄勒岡地鼠英文名稱(chēng):Oregon vole
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人卵巢腺癌細(xì)胞;SK-OV-3-Cas9-560生長(zhǎng)特性木糖-明膠培養(yǎng)基發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠肝內(nèi)膽管上細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
戊烷脒多粘菌素B瓊脂基礎(chǔ)炭疽桿菌的培養(yǎng)及初步鑒定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Super-Bradford蛋白定量試劑盒200ml國(guó)產(chǎn)
QSG-7701(人正常肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2