以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
絲氨酸水解酶抑制劑(AA26-9)
| AA26-9 | 1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
AA26-9是有效廣譜的絲氨酸水解酶抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1312782-34-5 純度:99.78% 分子式:C?H??N?O 分子量:166.18 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
嗜鹽四聯(lián)球菌磷化組蛋白H3抗體Human SCN10A ELISA Kit鮭魚(yú)補(bǔ)體蛋白3(C3)免疫試劑盒
谷棒狀桿菌(黃色短桿菌)*磷化組蛋白H3抗體Human SCML2 ELISA Kit狗ELISA Kit
大腸埃希菌磷化組蛋白H3抗體Human SCARA5 ELISA Kit狗微管相關(guān)蛋白tau(MAPT)免疫試劑盒
福山假絲酵母組蛋白去乙?;?/span>5抗體Human SCN2B ELISA Kit狗基乙酰,delta-脫水(ALAD)免疫試劑盒
鴨疫里氏桿菌A型流感病H5N1凝集Human SCARF1 ELISA Kit狗15 - 基-13,14-二氫前列腺F2α(15-keto-13,14-dihydro-PGF2α)免疫試劑盒
橙色桿狀菌人巨病UL49蛋白抗體Human MUC15(Mucin-15) ELISA KitELISA Kit
褐球固氮菌*肝核因子1β/HNF-1β抗體Human SCCPDH ELISA Kit脂聯(lián)(ADP)免疫試劑盒
埃切畢赤酵母HHLA3蛋白抗體Human SART1 ELISA Kit胃泌(Gastrin)免疫試劑盒
球孢白僵菌HHIP樣蛋白2抗體Human SCEL ELISA Kit胃動(dòng)(MTL)免疫試劑盒
多分枝靈芝A型流感病H3N2-M2蛋白抗體Human SART3 ELISA Kit白蛋白(Albumin)免疫試劑盒
植物乳桿菌HSH2D抗體Human SAT2 ELISA Kit5羥色(5-HT)免疫試劑盒
美澳型核果褐腐病菌水蛭抗體Human SAMM50 ELISA Kit鵝ELISA Kit
犁黑輪斑交鏈孢霉白抗原A抗體Human SASS6 ELISA Kit鵝維生D3(VD3)免疫試劑盒
季也蒙邁耶氏酵母人瘤病16型E7抗體Human A1BG(Alpha-1B-glycoprotein) ELISA Kit鵝降鈣(CT)免疫試劑盒
空腸彎曲桿菌人類狀瘤病58 E6蛋白抗體Human SATB1 ELISA Kit鵝骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒
宇佐美曲霉人類狀瘤病16抗體Human SATB2(Special AT-rich sequence-binding protein 2) ELISA Kit鵝鈣結(jié)合蛋白(CR)免疫試劑盒
毛殼菌Chaetomium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3%橙黃決明
釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品光甘草定
: SK1061/61資源名稱: 喬德普爾沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%鹽石蒜堿
絲氨酸水解酶抑制劑(AA26-9)BOb-1 B特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體3-膽蒽標(biāo)準(zhǔn)溶液100 ng/μl,溶劑:
A Raf/ARAF A-Raf抗體滅蟻靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品
phospho-A Raf(Ser214) 化A-Raf抗體二十酯 98% (GC)
Phospho-A Raf (Ser299) 化A-Raf抗體蓖麻油酯 ≥99% (GC)
Phospho-A Raf (Tyr301/302) 化A-Raf抗體月桂烯 ≥90%
B-Raf B Raf抗體月桂烯 ≥90.0% (GC)
c-Raf/Raf1 c Raf/Raf1抗體十九酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
phospho-B-Raf (Ser365) 化B-Raf抗體棕櫚油酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品