詳細(xì)介紹
人肝癌細(xì)胞;SMMC-7721生長特性注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人宮頸癌細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶!
細(xì)胞名稱 人肝癌細(xì)胞;SMMC-7721生長特性
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 取人肝癌組織,采用靜置和旋轉(zhuǎn)管法培養(yǎng)11天細(xì)胞開始生長,*傳代23天。AFP陽性。用Northern blot方法,未能檢測到細(xì)胞中1.3kb LFIRE-1/HFREP-1 mRNA的表達(dá),免疫缺陷小鼠體內(nèi)可成瘤。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C65
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權(quán)限 A類
人肝癌細(xì)胞;SMMC-7721生長特性復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
考馬斯亮藍(lán)G-250染液
pUN100
Sodium Phosphate Buffer(磷酸鈉緩沖液),0.5M,pH7.5
人1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βD-Glu)ELISA Kit
大腸桿MDS42 recA種
pFLAG-CTC(pFLAGCTC)
小鼠組蛋白H2b(Histon-H2b)ELISA Kit
Lambda DNA(B)
pSJS 1240(pSJS1240)
Potassium Phosphate Solution,0.5M, pH7.4
人白介素4(IL-4)ELISA Kit
Smithella medium
pECFP-Mito(pECFPMito)(60908-2552)
小鼠催素(PRL)ELISA Kit
真DNA提取
pSA3-12(pSA312)
Denaturing Solution
毒蛇因子(CVF) ELISA Kit
Methanococcus voltae medium
pCLL9
兔子纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA Kit
DNA尿素-PAGE上樣液(10 mL)
pPD79_44(pPD7944)
Zugibe 改良硝酸銀法特殊細(xì)胞染色試劑盒
大鼠解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA Kit
Desulfovibrio gigas medium
pcDNA3-CFP (pcDNA3CFP)(60908-1610)
人游離脂肪酸(FFA)ELISA Kit
凋亡DNAout
pMCSG38C JWH 203 (5 mg)2-(2-chlorophenyl)-1-(1-pentyl-1H-indol-3-yl)-ethanone; JWH 203
Vigabatrin (25 mg)4-amino-5-hexenoic acid; Sabril
JWH 210 6-ethylnaphthyl isomer (1 mg)(6-ethylnaphthalen-1-yl)(1-pentyl-1H-indol-3-yl)methanone; JWH 210 6-ethylnaphthyl isomer
bk-MDEA (hydrochloride) (50 mg)1-(benzo[d][1,3]dioxol-5-yl)-2-(ethylamino)propan-1-one, monohydrochloride; RvD1|MDEC|Ethylone|bk-Methylenedioxyethylamphetamine|3,4-Methylenedioxy-N-ethylcathinone; bk-MDEA (hydrochloride)
N-Arachidonoyl-L-Alanine (25 mg)N-(1-oxo-5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenyl)-L-alanine; NALA; N-Arachidonoyl-L-Alanine
Oleic Acid (500 mg)9Z-Octadecenoic acid; Oleic Acid
Capsaicin (50 mg)N-[(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl]-6E-8-methyl-nonenamide; Capsaicin
Neopterin (100 mg)2-amino-6-[1S,2R,3-trihydroxypropyl]-4(3H)-pteridinone; Neopterin
(-)-(S)-Cathinone (hydrochloride) (5 mg)2-ami-phenyl-1-propanone, monohydrochloride; (-)-(S)-Cathinone (hydrochloride)
Cannabidiolic Acid (1 mg)2,4-dihydroxy-3-[(1R,6R)-3-methyl-6-(1-methylethenyl)-2-cyclohexen-1-yl]-6-pentyl-benzoic acid; β-Resorcylic Acid|CBDA; Cannabidiolic Acid
Topotecan (hydrochloride) (10 mg)10-[(dimethylamino)methyl]-4S-ethyl-4,9-dihydroxy-1H-pyrano[3’,4’:6,7]indolizi,2-b]quinoline-3,14(4H,12H)-dione, monohydrochloride; Hycamtin|NSC 609669|SKF 104864A; Topotecan (hydrochloride)
JWH 203 N-(5-hydroxypentyl) metabolite (5 mg)2-(2-chlorophenyl)-1-(1-(5-hydroxypentyl)-1H-indol-3-yl)ethan-1-one; JWH 203 N-(5-hydroxypentyl) metabolite
Tanshinone IIA (5 mg)6,7,8,9-tetrahydro-1,6,6-trimethyl-phenanthro[1,2-b]furan-10,11-dione; NSC 686518|NSC 686519|TSA; Tanshinone IIA