以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
Firocoxib(ML1785713)是COX-2高效選擇性抑制劑,IC50值為0.13uM,比對(duì)COX-1的抑制效果強(qiáng)58倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):189954-96-9 別名:ML 1785713 純度:99.50% 分子量:336.4 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
釀酒酵母熱休克蛋白J2抗體Human AHR(Aryl hydrocarbon receptor) ELISA Kit人β4整合(ITG β4/CD104)免疫試劑盒
異常漢遜酵母雙特異性酪磷化調(diào)節(jié)激1B抗體Human RHOT1 (Mitochondrial Rho GTPase 1) ELISA KIT人β2轉(zhuǎn)鐵蛋白(β2TF)免疫試劑盒
地中海中慢生根瘤菌*二?;视图?抗體Human RD3 (Protein RD3) ELISA KIT人β2整合(ITG β2/CD11+CD18)免疫試劑盒
慢生根瘤菌DNA依賴蛋白激催化亞基抗體Human RRAD (GTP-binding protein RAD) ELISA KIT人β2微球蛋白(BMG/β2-MG)免疫試劑盒
青黃褐硬皮馬勃雙同源框蛋白4抗體Human RCCD1 (RCC1 domain-containing protein 1) ELISA KIT人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)免疫試劑盒
釀酒酵母無(wú)精癥缺失基因1抗體Human RASAL1 (RasGAP-activating-like protein 1) ELISA KIT人β2糖蛋白(β2-GP)免疫試劑盒
膠孢磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體Human ANKRD19P (Putative ankyrin repeat domain-containing protein 19) ELISA KIT人β1腎上腺能受體(β1AR)抗體免疫試劑盒
多主葡萄殼菌通道蛋白DRK1抗體Human RCSD1 (CapZ-interacting protein) ELISA KIT人β1,4-N-乙?;肴樘寝D(zhuǎn)移2(B4GALNT2)免疫試劑盒
蜜蜂生球擬酵母GTP發(fā)育調(diào)控結(jié)合蛋白1抗體Human RCE1 (CAAX prenyl protease 2) ELISA KIT人β,β胡蘿卜9',10'加氧(BCO2)免疫試劑盒
米川黃桿菌骨架4.1蛋白家族DAL1抗體Human RALGPS1 (Ras-specific guanine nucleotide-releasing factor RalGPS1) ELISA KIT人α-烯化(ENO1/ENO1L1/MBPB1/MPB1)免疫試劑盒
平滑假絲酵母DAP凋亡誘導(dǎo)蛋白激2抗體Human REPS1 (RalBP1-associated Eps domain-containing protein 1) ELISA KIT人α戊二脫氫(α-KGDHC)免疫試劑盒
慢生根瘤菌信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能磷蛋白DAB2抗體Human RFXANK (DNA-binding protein RFXANK) ELISA KIT人α乳清蛋白(α-La)免疫試劑盒
黃赭色鏈霉菌命運(yùn)決定因子DACH1抗體Human RBCK1 (RanBP-type and C3HC4-type zinc finger-containing protein 1) ELISA KIT人α葡萄糖苷(α-glucosidase)免疫試劑盒
米根霉Dab2相互作用蛋白抗體Human RSC1A1 (Regulatory solute carrier protein family 1 member 1) ELISA KIT人α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)免疫試劑盒
食砜節(jié)桿菌線粒體2,4-雙烯酰還原1抗體Human RAP1GAP2 (Rap1 GTPase-activating protein 2) ELISA KIT人α-內(nèi)肽(α-EP)免疫試劑盒
大腸桿菌動(dòng)力蛋白激活蛋白亞基3抗體Human RXFP2 (Relaxin receptor 2) ELISA KIT人α肌動(dòng)蛋白(α Actin)免疫試劑盒
膠孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質(zhì)量規(guī)格:100µg/mL,基體: 1%HCl芹菜苷
鏈霉菌(吸類群)Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:濃度范圍:0.959-1.01(mg/L),分析標(biāo)準(zhǔn)品7-乙基-10羥基喜樹堿
球形芽孢桿菌Bacillus│sphaericus 質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml葒草-2"-0-B-L半乳糖苷
COX-2抑制劑(Firocoxib)奧美拉唑磺?;铮?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Glipizide癌胚抗原相關(guān)粘附分子1抗體包裝500ml
奧美拉唑鎂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Donepezil HCl趨化樣因子受體1抗體包裝1g
奧美拉唑鈉一合物(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Estrone造血干抗原CD133抗體包裝1g
奧美沙坦酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: EstroneG蛋白偶聯(lián)受體相互作用蛋白1抗體(補(bǔ)體Clq TNF相關(guān)蛋白1)包裝250mg
奧沙拉秦鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Clindamycin HCl心肌營(yíng)養(yǎng)1抗體包裝5g
奧沙利鉑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Clindamycin HClC型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員B抗體包裝5g
奧沙普秦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Verapamil HCl陽(yáng)離子通道相關(guān)蛋白β亞基抗體包裝1g
奧硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Verapamil HCl特異性蛋白57抗體包裝250mg
奧扎格雷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mycophenolic acidL選擇抗體包裝1g
奧扎格雷鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Mycophenolic acidCD53抗體包裝25g
巴卡丁 III(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amoxicillin 死亡同源蛋白6抗體包裝5g
巴柳氮鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Amoxicillin 離子通道KB抗體包裝25g
巴龍霉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: FenofibrateC型凝集結(jié)構(gòu)域家族12成員A抗體包裝5g
巴芬(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Fenofibrate離子通道蛋白2抗體包裝1g
巴芬雜質(zhì)A(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: ProbenecidC型凝集結(jié)構(gòu)域家族9成員A抗體包裝25mg