詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱(chēng):淀粉磷酸化酶(SP)紫外分光光度法
規(guī)格:50管/48樣
測(cè)試方法:紫外分光光度法
分類(lèi):淀粉系列
貨號(hào):GOY-01S6694
客戶(hù)自備儀器和試劑
商品介紹:
測(cè)定意義 淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代謝過(guò)程的可逆反應(yīng)酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。 在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于質(zhì)體中,負(fù)責(zé)延長(zhǎng)淀粉的 α-1,4-葡萄糖鏈的非還原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中,催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵磷酸解產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,負(fù)責(zé)葡萄糖鏈的磷酸解,是淀粉代謝過(guò)程中的關(guān)鍵酶。 在植物體中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物無(wú)機(jī)磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸濃度幾乎高了兩個(gè)數(shù)量級(jí),一般認(rèn)為淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要測(cè)定意義。 測(cè)定原理: 淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵與無(wú)機(jī)磷反應(yīng)產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖變位酶的作用下產(chǎn)生葡萄糖-6-磷酸,并在6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原NADP+產(chǎn)生NADPH,使340nm下吸光值增加。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類(lèi)及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
特點(diǎn): 1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成 2、靈敏度高,操作便捷 3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑 | 儀器: 1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀(比色測(cè)定波長(zhǎng)為550nm) 2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃) 3、臺(tái)式離心機(jī) 4、漩渦混勻器 5、微量移液器 |
樣品測(cè)定的準(zhǔn)備:
1、細(xì)胞、細(xì)菌或組織樣品的制備 :
細(xì)菌或細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),棄上清;按照每100萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次),之后置沸水浴振蕩提取10min;10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測(cè)。
組織:稱(chēng)取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測(cè)。
2、血清(漿)樣品:取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,10000g,常溫離心10分鐘,取上清,冷卻后待測(cè)。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的處理:稱(chēng)取1mg,將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。
大鼠三狀腺原氨(T3)試劑盒化鈣溶液(2.5mol/L,無(wú)菌)D-3-(1-萘)-氨鹽鹽 99%3,5-二溴 98%
大鼠狀腺素(T4)試劑盒化溶液(1mol/L)3-(1-萘)-L-氨 98% 5--4,6-二羥嘧啶 97%
大鼠狀腺素(T4)試劑盒化溶液(3.5mol/L)3-氨-L-酪氨 98%4,6-二-5-嘧啶 98%
大鼠游離狀腺素(FT4)試劑盒化溶液(3.5mol/L,無(wú)菌)D-氨 98%二聚環(huán)戊二烯 97%,Endo
大鼠游離狀腺素(FT4)試劑盒化鋰溶液(1mol/L)DL-α-氨異丁 98%2,4,6-三溴苯酚 98%
大鼠游離三狀腺原氨(Free-T3)試劑盒化鋰溶液(1mol/L,無(wú)菌)D-氨芐酯對(duì)苯磺鹽 98%1,2,4-三氮唑-3-羧酯 99%
大鼠游離三狀腺原氨(Free-T3)試劑盒化鋰溶液(5mol/L,無(wú)菌)N-乙酰-L-蛋氨 98.5%鈷 98%
大鼠新生狀腺素(NN-T4)試劑盒化鋰乙溶液(1mol/L)N-乙酰-L-酪氨乙酯 98%氧乙酯 99%
大鼠新生狀腺素(NN-T4)試劑盒化鎂溶液(1mol/L)3-(乙酰硫) 98%納他霉素 ≥95% (HPLC)
大鼠胰島素(INS)試劑盒化鎂溶液(1mol/L,無(wú)菌)L-氨4-硝酰苯鹽鹽 99%L-羥鈷素 96%
大鼠胰島素(INS)試劑盒溶液(1mol/L)D-氨酰鹽鹽 98%維B12 98%
大鼠C肽(C-Peptide)試劑盒溶液(1mol/L,無(wú)菌)L-天冬氨二叔丁酯鹽鹽 99%鈷 分析標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠C肽(C-Peptide)試劑盒溶液(5mol/L)N-叔丁氧羰-N'-(2,2,4,6,7-五二氫苯并呋喃-5-磺酰)-L-精維B12 用于培養(yǎng)和昆蟲(chóng)培養(yǎng)
大鼠絨毛膜促性腺激素(CG)試劑盒溶液(5mol/L,無(wú)菌)Fmoc-氨-王樹(shù)脂 100-200 mesh, 1%DVB,Substitution 0.3-0.2-(2-溴乙)四氫-2H-吡喃 96%
大鼠絨毛膜促性腺激素(CG)試劑盒明膠水溶液(1%)AminOMethyl Polystyrene Resin 0.5~1.5 mmol/g, 100~200 mesh2-氨-1,3- 98%
大鼠促黃體激素(LH)試劑盒明膠水溶液(1%,無(wú)菌)BETA淀粉樣蛋白片段1-40 ≥90% (HPLC), powder三溴硅烷, 含穩(wěn)定劑銅, 98%
淀粉磷酸化酶(SP)紫外分光光度法兔衰變加速因子(DAF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 5-三硅烷-4-戊炔-1-黑曲霉拉丁屬名: Stereum hirsutum
兔BCL2修飾因子(BMF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Fmoc-N-三苯-L-谷氨酰毛韌革菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔Bcl2關(guān)聯(lián)永生因3(BAG3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Fmoc-N-三苯-L-谷氨酰莫哈韋芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
兔叉頭框蛋白P3(FOXP3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒L-天門(mén)冬二氨枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Colletotrichum sp.
兔嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CYPA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Nα-Fmoc-Nγ-三苯游-L-谷氨五氟苯酯盤(pán)孢屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔天青殺素1(AZU1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 Nα-Boc-Nδ-三苯-L-谷氨酰黃孢平革菌拉丁屬名: Rhizopus oryzae
兔抑制蛋白β1(ARRβ1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒Nα-Boc-Nδ-三苯-L-谷氨酰米根霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔早老素2(PS2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 4-(2-氨乙)吡啶橄欖色盾殼霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔蛋白磷1調(diào)控亞1A(PPP1R1A)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒氧芴哈茨木霉注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔胸表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 氧芴裂孔平伏菌用途: 植物病原物;用于該類(lèi)群菌的系統(tǒng)學(xué)研究
兔間隙連接蛋白β1(GJβ1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒氧芴禾炭疽盤(pán)孢菌拉丁屬名: Rhizopus stolonifer var. stolonifer
兔著絲粒蛋白E(CENPE)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 二苯并噻吩匍枝根霉原變種注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔凝子Ⅹ(F10)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 二苯并噻吩寬?cǎi)迠W德蘑拉丁屬名: Streptomyces lavendulae subsp. lavendulae
兔膽囊收縮素/腸促胰肽A受體(CCKAR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 D-葡萄烯糖淺紫灰鏈霉菌淺紫灰亞種注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
兔蛋白激C-η(PKCη)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒D-葡萄烯糖角殼囊孢用途: 脂肪產(chǎn)生菌。
兔線(xiàn)粒體肌激1A(CKMT1A)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 環(huán)氧烯縮二乙維斯假絲酵母拉丁屬名: Rhizobium herbae
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。