小鼠小腸隱窩上皮原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠小腸隱窩上皮細胞分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的，因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點是管壁有環(huán)形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切；構(gòu)成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內(nèi)分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能，其中以吸收和分泌功能為主。小腸腔面的環(huán)行皺襞從幽門附近開始出現(xiàn)，在十二指腸末段和空腸頭段極發(fā)達，向下逐漸減少和變矮，至腸中段以下基本消失。粘膜表面還有許多細小的腸絨毛，是由上皮和固有層向腸腔突起而成，形狀不一，以十二指腸和空腸頭段。絨毛于十二指腸呈葉狀，于空腸呈指狀，于回腸則細而短。環(huán)行皺襞和絨毛使小腸表面積擴大20-30倍，絨毛根部的上皮下隱至固有層形成管狀的小腸腺，又稱腸隱窩，故小腸腺與絨毛的上皮是連續(xù)的，小腸腺直接開口于腸腔。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠小腸隱窩上皮細胞采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的小鼠小腸隱窩上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

FLRT1 Others Human 人 FLRT1 人細胞裂解液   人腎皮質(zhì)上皮細胞HRCEpiC  CM-M025小鼠外周血白細胞原代平滑肌細胞特制基礎(chǔ)Many types of cells包裝：500/250/Mv 1 lu   貂肺上皮細胞 小鼠原代骨髓間充質(zhì)干細胞 人原代睪丸支持細胞

CCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12 0.5mgCCL12/MCP-5(C-C motif chemokine 12) 單核細胞趨化蛋白5抗原

FST Protein Human 重組人 Follistatin / FST (FS288) 蛋白

CA4重組小鼠 Carbonic Anhydrase IV / Car4 蛋白 Protein

CD8A Protein Rat 重組大鼠 CD8A / Lyt2 蛋白 (Fc 標簽)

UBE2M重組人 UBE2M 蛋白 Protein

大鼠血紅素氧合酶1(HO1)試劑盒 ，英文名： HO1 ELISA Kit

Mouse coicosterone / coicosterone (CO) ELISA Kit 小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)試劑盒

Mousetumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AILR3ELISAKit 小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumancecropinB,CecBELISAKit人殺菌肽B

細胞C-MET激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitDAT大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運蛋白

小鼠A(CsA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠對基苯(PABA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1IgA/G/M)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠小腸隱窩上皮原代細胞小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat basic fibroblast growth factor (bFGF) ELISA Kit 大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)試劑盒

HumaeplicationproteinA,RPA-70ELISAKit 人復(fù)制蛋白A(RPA-70)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human5-Nucleotidase,5-試劑盒人5核苷酸酶(5-)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌天青曙紅(Azure-eosinate)染色試劑盒50次

Mouseai-oligodendrocyte-myelinglycoproteinaibody,OMgp-AbELISAKit小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)試劑盒規(guī)格：96T/48T

TREM2重組小鼠 TREM2 蛋白 Protein

ATEXPA10 peptide 植物擴張蛋白ATEXPA10(擬南芥 0.5mgATEXPA10 peptide 植物擴張蛋白ATEXPA10(擬南芥)抗原

KIAA0101重組人 KIAA0101 / p15 / PAF 蛋白 Protein

GAP43 Protein Human 重組人 GAP43 / Neuromodulin 蛋白

CD5 Protein Rat 重組大鼠 CD5 蛋白

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。