Caspase抑制劑Z-VAD-FMK(20mM)公司*的產(chǎn)品：T7 tag T7 tag標(biāo)簽抗體鉻藍(lán)SE 99%，二水物
V5 tag V5 tag標(biāo)簽抗體鉻藍(lán)SE Indicator
KT3 tag KT3 tag抗體鉻藍(lán)SE Biological stain
VSV-G tag VSV-G tag標(biāo)簽抗體熒光 AR,90%
HIV gp120 艾滋病病抗體熒光 IND
HIV

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Caspase抑制劑Z-VAD-FMK(20mM)

英文名稱：

產(chǎn)品規(guī)格：100μl

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

4-[2-(5-基吡-2-?；?乙基]磺酰...英文名稱： Quetiapine Fumarate20號染色體開放閱讀框194抗體包裝250g

4-[2-(5--2-氧基酰)-乙基]-磺...英文名稱： Quetiapine Fumarate4號染色體開放閱讀框32抗體包裝50g

4-基安替比林（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Raltegravir K5號染色體開放閱讀框20抗體包裝100g

4-羥基（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Raltegravir胱抑D/半胱蛋白抑制劑D抗體包裝25g

4-羥基芐;對羥基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Rapamycin(Sirolimus)胱抑8/半胱蛋白抑制劑8抗體包裝10g

4-羥基間二（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Rapamycin(Sirolimus)胱抑9/半胱蛋白抑制劑9抗體包裝50g

4-異丁基（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Rasagiline Mesylate胱抑S/半胱蛋白抑制劑S抗體包裝1g

4－[2－（5--2－氧基酰）－乙基]－磺...英文名稱： Resveratrol煙堿型乙酰受體α3抗體包裝25g

4－差向四環(huán)（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Resveratrol3號染色體開放閱讀框33抗體包裝5g

5'-脫氧-5-胞苷(5’-DFCR)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Retigabine Base3號染色體開放閱讀框39抗體包裝25g

5-基楊,美沙拉秦(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Retigabine3號染色體開放閱讀框59抗體包裝5g

5-基-2,4-戊二烯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ribavirin5號染色體開放閱讀框51抗體包裝1g

5-氮胞苷/阿扎胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ribavirin3號染色體開放閱讀框70抗體包裝5g

5-基蜂蜜曲霉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ribostamycin Sulfate2號染色體開放閱讀框68抗體包裝1g

5-羥基色(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Rifabutin 2號染色體開放閱讀框47抗體包裝1g

酵母菌Saccharomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于培養(yǎng)血小板膜糖蛋白Ⅳ試劑盒異甘草;Isoliquiritigen

原小單孢菌屬菌種Promicromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa試劑盒柚皮苷;Naringin

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR血小板激活因子乙酰解2，質(zhì)試劑盒延胡索乙;Tetrahydropalm
Caspase抑制劑Z-VAD-FMK(20mM)臭曲霉 2,3,6-三氟芐生物羧化Elisa

熱帶假絲酵母 2-溴-3-羥基-6-甲基吡啶音猬因子Elisa

微紅微球?qū)?/span> 4-甲氧基-2-硝基-苯甲蓋他病Elisa

白僵 1-苯基-1,2,3,4-四氫異喹啉Salusinβ蛋白Elisa

地衣芽孢桿 6-硝基-1,2-苯并異噻唑啉-3-酮 1,1-二氧化物可溶性因子受體Elisa

阿舒假囊酵母 N-乙?；?3-甲β微球蛋白Elisa

米曲霉 4-三糖類抗原50Elisa

泡盛曲霉變種 5-硝基噻吩-2-羧酸糖類抗原199Elisa

植物乳桿 3-芐氧基苯甲酰肼糖類抗原153Elisa

核盤 硅化鎂糖類抗原242Elisa

溶血不動桿 順-6-壬烯糖類抗原724Elisa

短穩(wěn)桿 1-環(huán)戊烯基乙prestin 蛋白Elisa

異常漢遜酵母 2,3-二氫苯并呋喃-5-酸番茄紅Elisa

枯草芽孢桿 4-溴-2-羥基甲酯色P45011B1Elisa

黑根霉 6-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉色P45011B2Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)