商品介紹:
Ipragliflozin(ASP1941)是高活性SGLT2選擇性抑制劑,IC50為2.8nM,對SGLT1/3/4/5/6幾乎無活性。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:761423-87-4 別名:ASP1941 純度:98.67% 分子式:C??H??FO?S 分子量:404.45 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
黑曲霉磷化內(nèi)質(zhì)網(wǎng)核信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白a1抗體Human RHOB ELISA Kit組織蛋白H(CTSH)ELISA Kit
*櫻桃鏈格孢白介28受體抗體Human RHEB ELISA Kit組織蛋白G自身抗體(Cath G Ab)ELISA Kit
球孢白僵菌KB抑制蛋白激Ζ抗體Human RGS1(Regulator of G-protein signaling 1) ELISA Kit組織蛋白G(cath-G)ELISA Kit
亞歷山大富鹽菌胰島基因增強結(jié)合蛋白1抗體Human RFXAP ELISA Kit組織蛋白D(cath-D)ELISA Kit
爪哇根霉整合β1結(jié)合蛋白2抗體Human RGMA ELISA Kit組織蛋白C(CTSC)ELISA Kit
黑曲霉線粒體翻譯起始因子3抗體Human RGS11 ELISA Kit組蛋白乙酰化(HAT)ELISA Kit
栗疫菌白介27β抗體Human RFC3 ELISA Kit組蛋白脫乙?;?(HDAC2)ELISA Kit
猴頭菌胰島樣生長因子1受體抗體Human RGR ELISA Kit組蛋白去乙?;?(HDAC3)ELISA Kit
鐮刀菌FBXL11蛋白抗體Human IFI35(Interferon-induced 35 kDa protein) ELISA Kit組蛋白去乙?;?HDAC)ELISA Kit
草青霉免疫球蛋白超家族成員21抗體Human RFC4 ELISA Kit組蛋白賴N-甲基轉(zhuǎn)移SETD7(SETD7)ELISA Kit
冠突曲霉白介9抗體Human RECQL4 ELISA Kit組蛋白H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)ELISA Kit
埃切假絲酵母乙酰乳合成蛋白抗體Human RECQL5 ELISA Kit組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA Kit
釀酒酵母異檸檬脫氫1抗體Human RFC5 ELISA Kit組(HIS)ELISA Kit
乳菇屬IKK激相互作用蛋白抗體Human REDD1(Protein regulated in development and DNA damage response 1) ELISA Kit足標記蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA Kit
泌液克里格范瑞吉酵母磷化核因子NFκB抑制蛋白激i抗體Human RFFL ELISA Kit總前列腺特異抗原(tPSA)ELISA Kit
大櫻桃葉細菌性穿孔病*白介8抗體Human REEP1 ELISA Kit總蛋白S(TPS)ELISA Kit
葉下珠生擬莖點霉Phomopsis│phyllanthicola C.Q. Chang Z.D. Jiang & P.K. Chi 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)漆黃
小單孢菌Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)烏藥內(nèi)酯
枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)辛夷脂
SGLT2抑制劑(Ipragliflozin)CCL19/MIP-3 beta 巨噬炎性蛋白19抗體全氟辛 用于環(huán)境分析
CCL26/Eotaxin 3 嗜粒趨化蛋白3抗體2,4,6-三磺 5 % (w/v) 水溶液
CCL27/CTACK 皮膚T虜獲趨化因子抗體2-硫 96%
Dectin-1/CLECSF12 C型凝集結(jié)構(gòu)域家族7成員A姥鮫烷 98%
CCR-1 表面趨化因子受體1抗體4-(1-吡咯烷)苯 97%
Dectin-2 C型凝集結(jié)構(gòu)域家族6成員A抗體聚苯烯,1000 分析標準品
CCR-2/5/CD192 表面趨化因子受體2/5抗體聚(4-苯烯磺-共聚-馬來)鈉鹽 摩爾比率3:1
CCR-2A 表面趨化因子受體2A抗體聚(4-苯烯磺-共聚-馬來)鈉鹽 摩爾比率1:1