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細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(WST-1法)

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  • 細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(WST-1法)

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更新時(shí)間:2022-04-21 09:53:22瀏覽次數(shù):232

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100次|500次
貨號(hào) GOY-01X9529 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 WST-1?Cell?Proliferation?and?Cytotoxicity?Assay?Ki
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(WST-1法)公司正在出售的產(chǎn)品:Adenylyl cyclase/AC 腺苷環(huán)化酶抗體3-氨-2-惡唑烷酮 分析標(biāo)準(zhǔn)品
ACE1 血管緊張素轉(zhuǎn)換酶ACE1抗體抗壞血鈣 分析標(biāo)準(zhǔn)品
ACA11 擬南芥ACA11抗體阿特拉津 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%
AHA3 AHA3抗體(擬南芥)1-氨-5-萘酚 97%
ACE2 ACE2抗體4-雄烯-11β--3,17-二酮

詳細(xì)介紹

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(WST-1法)


WST-1 Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit

100次|500次

1~3天


商品介紹:

本試劑盒是一種廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒。WST-1是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan(參考下圖)。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。

WST-1是MTT的一種升級(jí)替代產(chǎn)品,和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。首先,MTT被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來(lái)溶解;而WST-1和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的,可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次,WST-1產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次,WST-1比XTT和MTS更加穩(wěn)定,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加穩(wěn)定。另外,WST-1和MTT、XTT等相比,線性范圍更寬,靈敏度更高(參考下圖)。

本試劑盒可以用于細(xì)胞因子等誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖檢測(cè),也可以用于抗癌藥物等對(duì)細(xì)胞有毒試劑誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性檢測(cè),或一些藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制檢測(cè)等。

本試劑盒檢測(cè)非常便捷。無(wú)須使用同位素,所有的檢測(cè)步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞,不必收集細(xì)胞,也不必采用額外步驟去溶解formazan??梢杂糜诖笈繕悠返臋z測(cè)。

酚紅和血清對(duì)本試劑盒的測(cè)定無(wú)明顯影響。WST-1對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。加入WST-1顯色后,可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀板,使檢測(cè)時(shí)間更加靈活,便于找到佳測(cè)定時(shí)間。

注意事項(xiàng):

由于使用96孔板進(jìn)行檢測(cè),如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng),一定要注意蒸發(fā)的問(wèn)題。一方面,由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā),可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加PBS,水或培養(yǎng)液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方,以緩解蒸發(fā)。

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè):

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
胰島原(PI)英文名稱:PI ELISA Kit磷化系統(tǒng)性紅斑狼瘡先關(guān)蛋白TREX1抗體包裝1g

胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)英文名稱:IGFBP-6 ELISA Kit磷化系統(tǒng)性紅斑狼瘡相關(guān)蛋白TREX1抗體包裝1g

胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)英文名稱:IGFBP-4 ELISA Kit接頭相關(guān)蛋白復(fù)合體AP-2μ鏈1抗體包裝25g

胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)英文名稱:IGFBP-2 ELISA Kit磷化接頭相關(guān)蛋白復(fù)合體AP-2μ鏈1抗體包裝5g

胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)英文名稱:IGFBP-1 ELISA Kit膜粘連蛋白7抗體包裝100g

胰島樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)英文名稱:IGF-2 ELISA Kit3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框15抗體包裝500g

胰島樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)英文名稱:IGF-1R ELISA Kit載脂蛋白B受體抗體包裝25g

胰島樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)英文名稱:IGF-1 ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體包裝5g

胰島受體β(ISR-β)英文名稱:ISR-β ELISA Kit載脂蛋白B抗體包裝1g

胰島降解(IDE)英文名稱:IDE ELISA Kit花生四烯15脂氧合2抗體包裝25g

胰島(INS)英文名稱:INS ELISA Kit載脂蛋白C4抗體包裝5g

原激活肽(TAP)英文名稱:TAP ELISA Kit低密度脂蛋白受體銜接蛋白抗體包裝1g

1(trypsin-1)英文名稱:trypsin-1 ELISA Kit原始廣泛存在蛋白1抗體包裝250mg

(trypsin)英文名稱:trypsin ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體包裝5g

α淀粉(AMY2A)英文名稱:AMY2A ELISA Kitα1,4-半乳糖基轉(zhuǎn)移1包裝25g

激活受體2B抗體程序性死亡蛋白1配體1(PDCD1LG1)Rucaparib phosphate (AG-014699 phosphate) 是一種有效、可口服的 PARP 抑制劑,結(jié)合 PARP1 的Ki 為 1.4
細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒(WST-1法)枯草芽胞桿 京尼平CD14分子檢測(cè)試劑盒

耐熱拉錢斯氏酵母 柚皮素CD163分子檢測(cè)試劑盒

長(zhǎng)枝木霉 酚CD20分子檢測(cè)試劑盒

細(xì)小不動(dòng)桿 2,4-二氯苯甲CD28分子檢測(cè)試劑盒

凍土毛霉 梔子苷CD30分子檢測(cè)試劑盒

枯草芽孢桿 D-(-)-赤蘚糖CD38分子檢測(cè)試劑盒

新城疫病 大豆低聚糖CD3分子檢測(cè)試劑盒

醋酸鈣不動(dòng)桿 低聚乳果糖CD40分子檢測(cè)試劑盒

高溫放線 化汞CD40配體檢測(cè)試劑盒

枯草芽孢桿 4-基-α-D-吡喃鼠李糖苷CD44變體6檢測(cè)試劑盒

短桿屬 金雀花堿CD44分子檢測(cè)試劑盒

冬蟲(chóng)夏草 絞股藍(lán)皂苷CD4分子檢測(cè)試劑盒

釀酒酵母 黃芪甲苷CD8分子檢測(cè)試劑盒

繡球* 槐果堿CD蛋白(損壞性關(guān)節(jié)炎)檢測(cè)試劑盒

大腸桿 5-甲基-2-氨基-3-硝基吡啶CIP2A檢測(cè)試劑盒



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