公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:alpha 7nAChR受體激動(dòng)劑(PNU-282987)
英文名稱:PNU-282987
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
PNU-282987是_alpha_7nAChR受體選擇性激動(dòng)劑,Ki值為26nM,對(duì)_alpha_1_beta_1_gamma__delta_和_alpha_3_beta_4nAChRs親和力弱。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):123464-89-1 純度:99.37% 分子式:C??H??Cl?N?O 分子量:301.21 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
芽孢乳菌干粉擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Human MIER2 ELISA Kit腦源性神經(jīng)生長因子(BDNF)ELISA Kit
釀酒酵母中腦核仁蛋白抗體Human MIER1 ELISA Kit腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)ELISA Kit
豌豆根瘤菌肌球蛋白重鏈7抗體Human F12(Coagulation factor XII) ELISA Kit腦鈉(BNP)ELISA Kit
微白黃鏈霉菌肌間蛋白1抗體Human MGAT1 ELISA Kit腦紅蛋白(NGB)ELISA Kit
河北鏈霉菌肌間蛋白2抗體Human MGAT4A ELISA Kit腦啡肽(ENK)ELISA Kit
費(fèi)氏中華根瘤菌肌球蛋白輕鏈激3抗體Human MGAT5B ELISA Kit腦腸肽(Ghrelin)ELISA Kit
大腸埃希菌肌球蛋白輕鏈激2抗體Human MGEA5(Protein O-GlcNAcase) ELISA Kit腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA Kit
釀酒酵母絲裂原活化蛋白激3K10抗體Human MGAT4C ELISA Kit囊蟲病抗體(CYT Ab)ELISA Kit
芽枝狀枝孢絲/蘇蛋白激MST4抗體Human mGluR1 ELISA Kit難辨梭狀芽孢桿菌B(TOXB)ELISA Kit
葡糖醋桿菌屬肌球蛋白7a/常染色體隱性耳聾蛋白2抗體Human KLK8(Kallikrein-8) ELISA Kit難辨梭狀芽孢桿菌A(TOXA)ELISA Kit
雜色曲霉膀胱癌突變蛋白1抗體Human MFSD7 ELISA Kit鈉-氯化物依賴性?;寝D(zhuǎn)運(yùn)體(SLC6A6/TAUT)ELISA Kit
球孢白僵菌肌肉特定環(huán)指蛋白3抗體Human mGluR2 ELISA Kit母親DPP同源物4(Smad 4)ELISA Kit
栗疫菌腸分化相關(guān)因子1抗體Human MFSD8 ELISA Kit末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移(TdT)ELISA Kit
樊慶生氏紅球菌環(huán)指蛋白62抗體Human MGAT4C ELISA Kit末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA Kit
泛菌屬MHC I類鏈相關(guān)蛋白BHuman MGAT1 ELISA Kit膜內(nèi)?;?ANPEP)ELISA Kit
釀酒酵母膜蛋白MLC1抗體Human MGAT4A ELISA Kit膜聯(lián)蛋白A5(AnnexinA5)ELISA Kit
膠孢Colletotrichum│gloeosporioides 質(zhì)量規(guī)格:≥97% ,進(jìn)分胡黃連苷III
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR胡黃連苷II
海棍狀菌Maritimibacter│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR胡黃連苷I
alpha 7nAChR受體激動(dòng)劑(PNU-282987)E.coli DH-5 Alpha DH5α大腸桿菌菌體蛋白抗體月桂酯 99%
E.coli O157:H7 大腸桿菌埃希氏菌O157抗體(腸出血性大腸桿菌埃希氏菌O157:H7)月桂酯 Standard for GC,≥99.5% (GC)
EPEC/E.coli 腸致病性大腸桿菌抗體十二酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
E.coli/EPEC 抗普通大腸埃希菌菌體蛋白抗體環(huán)戊烯酮 98%
E.coli O139 抗志賀大腸桿菌O139抗體(仔豬水腫病志賀大腸桿菌O139)3-戊 99%
EP3 前列腺E受體3抗體3-戊 ≥98%, FG
Ephrin A1 EphA1抗體鄰氨苯酯 99%
EphA4 酪氨蛋白激A4抗體鄰氨苯酯 ≥98%, FCC,FG