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增強(qiáng)型CCK-8試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-21 09:54:35瀏覽次數(shù):332

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100次|500次|2500次|10000次
貨號(hào) GOY-01X9531 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 Enhanced Cell Counting Kit-8
增強(qiáng)型CCK-8試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:ACTH (1-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素(1-39)抗體苯 無水級(jí), 99.8%
ACTH (18-39) 促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH(18-39)抗體叔丁 分析標(biāo)準(zhǔn)品
ACTH (7-23) 促腎上腺皮質(zhì)激素ACTH (7-23)抗體4-叔丁吡啶 98%
Actin alpha 肌動(dòng)蛋白α抗體鄰苯二丁芐酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
Actinin alpha 4

詳細(xì)介紹

商品介紹:

本試劑盒是一種基于WST-8而廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒,比普通的CCK-8試劑盒具有更好的檢測靈敏度和更寬的線性范圍。

WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan(參考圖1)。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。

WST-8是MTT的一種升級(jí)替代產(chǎn)品,和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。首先,MTT被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;而WST-8和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的,可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次,WST-8產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加穩(wěn)定,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加穩(wěn)定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比線性范圍更寬,靈敏度更高。

WST-8和WST-1相比,檢測靈敏度更高,更易溶解,并且更加穩(wěn)定。

本試劑盒可以用于細(xì)胞因子等誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖檢測,也可以用于抗癌藥物等對細(xì)胞有毒試劑誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性檢測,或一些藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞生長抑制檢測。

本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的增強(qiáng)型CCK-8溶液,無須再進(jìn)行任何配制等操作。無須使用同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞,不必收集細(xì)胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan??梢杂糜诖笈繕悠返臋z測。酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。

WST-8對細(xì)胞無明顯毒性。加入增強(qiáng)型CCK-8溶液顯色后,可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀板,使檢測時(shí)間更加靈活,便于找到佳測定時(shí)間。

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

增強(qiáng)型CCK-8試劑盒

 

Enhanced Cell Counting Kit-8

100次|500次|2500次|10000次

1~3天

 

操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測:

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測:

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)英文名稱:CIC ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體包裝500g

血小板因子4(PF-4/CXCL4)英文名稱:PF-4/CXCL4 ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白22抗體包裝1g

血小板因子3(PF-3)英文名稱:PF-3 ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白50抗體包裝1g

血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)英文名稱:PDGFsR-α ELISA Kit氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP合成6G抗體包裝5g

血小板衍生生長因子CC(PDGF-CC)英文名稱:PDGF-CC ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體包裝5ml

血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)英文名稱:PDGF-BB ELISA Kit錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體包裝100mg

血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)英文名稱:PDGF-AB ELISA Kit型肝炎病核結(jié)合蛋白-1抗體包裝1g

血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)英文名稱:PDGF-AA ELISA Kit芳香基硫酯K抗體包裝100MG

血小板生長因子(PDGF)英文名稱:PDGF ELISA Kit神經(jīng)元突觸前膜蛋白抗體包裝50MG

血小板生成(TPO)英文名稱:TPO ELISA Kit錨定蛋白G抗體包裝25g

血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)英文名稱:GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61 ELISA Kit肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin抗體包裝5g

血小板活化因子(PAF)英文名稱:PAF ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血1型抗體包裝1g

血小板反應(yīng)蛋白/凝血敏感蛋白1(TSP-1)英文名稱:TSP-1 ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血1型-7抗體 (N端抗體)包裝250mg

血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)英文名稱:FDP ELISA Kit整合樣金屬蛋白與凝血1型-7抗體包裝5g

血纖蛋白原γ鏈(FGG)英文名稱:FGG ELISA Kit內(nèi)收蛋白抗體包裝250mg

磷化芳香N-乙?;D(zhuǎn)移抗體白介2(IL2)XL413 hydrochloride 是一種有效的,選擇性的,ATP 競爭性的 Cdc7 抑制劑,IC50 值為 3.4 nM,同時(shí)對 CK2 和 PIM1
增強(qiáng)型CCK-8試劑盒枝狀枝孢 根皮素Delta-like ligand 1檢測試劑盒

中國節(jié)叢孢 鄰甲氧基肉桂Delta-like ligand4檢測試劑盒

麥?zhǔn)辖惶鎲伟?/span> N-Cbz-L-組氨酸Dickkopf 1檢測試劑盒

嗜管歐文氏 4-溴-3-甲酸甲酯DLEC1檢測試劑盒

豬丹絲 2-甲氧基-5-氟尿嘧啶DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1檢測試劑盒

棒曲霉 4-氟-2-DNA修復(fù)基因XRCC1檢測試劑盒

變平滑假絲酵母 二芐基二硫代氨酸鋅D二聚體檢測試劑盒

黑木耳8808 2,6-二硫酸鹽D-乳酸檢測試劑盒

空腸彎曲桿 4-乙酰氨-2,2,6,6-四甲基-1-氧D-乳酸鹽檢測試劑盒

釀酒酵母 4-氨基-2,2,6,6-四甲基氧自由基D-天冬氨酸檢測試劑盒

高粱生平臍蠕孢 5-溴戊酸乙酯D-天冬氨酸氧化酶檢測試劑盒

糞腸球 5-溴-2-氟EB病衣殼抗原IgA檢測試劑盒

彩色豆馬勃 反式-1,2-環(huán)己二Endoglin檢測試劑盒

黑曲霉 叔戊鈉ENOSF1基因檢測試劑盒

大腸埃希氏 3,5-二氨基-6-氯吡-2-羧酸甲酯膜外核苷酸焦磷酸酶;磷酸二酯酶家族成員2檢測試劑盒

 


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