公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:PDHK抑制劑(AZD7545)
英文名稱:AZD7545
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
AZD7545是PDHK抑制劑,對(duì)PDHK1和PDHK2的IC50分別為36.8nM和6.4nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):252017-04-2 純度:99.80% 分子式:C??H??ClF?N?O?S 分子量:478.87 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
芽孢桿菌屬谷受體2抗體Human UXT ELISA Kit大鼠組織因子與活化7復(fù)合物免疫試劑盒
蒙氏假單胞菌谷受體3抗體Human VPS53 ELISA Kit大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)免疫試劑盒
玉龍小單孢菌谷受體4抗體Human VPS54 ELISA Kit大鼠組織因子(TF)前體 免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌促代謝型谷受體1抗體Human FLOT1(Flotillin-1) ELISA Kit大鼠組織因子(TF)免疫試劑盒
枯草芽胞桿菌甘受體α4抗體Human VPS72 ELISA Kit大鼠組織型纖溶原激活劑(t-PA) 免疫試劑盒
綠粘帚霉生長(zhǎng)分化因子8抗體Human VPS8 ELISA Kit大鼠組織多肽抗原(TPA)免疫試劑盒
哈茨木霉磷化糖原合激-3β抗體Human VSTM1(V-set and transmembrane domain-containing protein 1) ELISA Kit大鼠組織蛋白去乙?;?HD)免疫試劑盒
滑菇Glu-Glu tag抗體Human VSTM2L ELISA Kit大鼠組織蛋白K(cath-K)免疫試劑盒
毛木耳胰高血糖樣肽-2抗體Human USP49 ELISA Kit大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)免疫試劑盒
釀酒酵母甘受體alpha 1/2/3型抗體Human USP5 ELISA Kit大鼠組N-甲基轉(zhuǎn)移(HNMT)免疫試劑盒
類阿達(dá)青霉抑制型G蛋白α3抗體Human USP50 ELISA Kit大鼠組(HIS)免疫試劑盒
根瘤菌促性腺激釋放激受體抗體Human USP53 ELISA Kit大鼠足標(biāo)記蛋白/足盂蛋白(PCX)免疫試劑盒
大腸埃希菌生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2抗體Human USP9X ELISA Kit大鼠總膽汁(TBA)免疫試劑盒
皮落青霉GATA結(jié)合蛋白3抗體Human USP35 ELISA Kit大鼠總膽紅(TB)免疫試劑盒
薄層菌粒-巨噬集落激因子受體α抗體Human USP36 ELISA Kit大鼠自然抗性相關(guān)巨噬蛋白1(NRAMP-1)免疫試劑盒
拜耳結(jié)合酵母骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白抗體Human USP37 ELISA Kit大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白(TF)免疫試劑盒
黑曲霉Aspergillus│niger var. niger Tiegh. 質(zhì)量規(guī)格:0.99氧代川南亭堿
白黃鏈霉菌Streptomyces│alboflavus 質(zhì)量規(guī)格:0.97苔黑酚葡萄糖苷;地衣二葡萄糖苷
根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:0.98酚-7-O-葡萄糖苷
PDHK抑制劑(AZD7545)1-羥基-3,4,5-三氧山(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ammonium acetate雌誘導(dǎo)基因121蛋白抗體包裝100g
10-姜酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Cellulose, Microcrystalline內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體包裝25g
10-羥基癸(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: alpha-Lactose, monohydrate骨架連接質(zhì)膜蛋白抗體包裝500g
10-羥基癸烯,10-HDA(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Calcium chloride, dihydrate吞噬運(yùn)動(dòng)蛋白1抗體包裝100g
10-羥基喜樹堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ethylene glycol酪蛋白激受體A10抗體包裝25g
10-脫乙酰巴卡亭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Magnesium sulfate, heptahydrate腸道病71型/手足口病病抗體包裝5g
11(α)氧基柴胡皂苷F英文名稱: Glucozyme轉(zhuǎn)錄因子ELF1抗體包裝100g
11-O-羅漢果苷V(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PEG 4000酪蛋白激B3抗體包裝25g
11-O-異丁?;?12-O-乙?;P(guān)藤甘元B-3-...英文名稱: Potassium phosphate, dibasic, anhydrous磷化酪蛋白激受體B1+B2抗體包裝500g
11-羥基柳杉酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Formamide酪蛋白激受體B1+B2+B3+B4抗體包裝10g
11-羰基-β-乙酰乳香(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: PEG 8000空通氣孔樣蛋白2抗體包裝50g
12-Epinapelline英文名稱: Lithium chloride同源盒蛋白轉(zhuǎn)錄因子EN2抗體包裝100g
12-O-Tiglylphorbol-13 –isob...英文名稱: Ammonium iron(II) sulfate, hexahydrate磷化外信號(hào)調(diào)節(jié)激5抗體包裝25g
13-氧-(9E,11E)-十八碳二烯英文名稱: TTC,TTZ,Tetrazolium RedCD39樣蛋白1抗體包裝5g
14α-羥基Sprengerinin C英文名稱: Sulfamethoxypyridazine真核翻譯起始因子5抗體包裝25g