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細(xì)胞膜綠色熒光探針(DiO)

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更新時(shí)間:2022-04-21 14:40:45瀏覽次數(shù):395

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10mg
貨號 GOY-01X9774 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 DiOC18(3)
細(xì)胞膜綠色熒光探針(DiO)公司正在出售的產(chǎn)品:Phospho-Mre11 (Ser676) 化DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體鉭桿 diam. 3 mm, ≥99.95% metals basis
MPO 髓過氧化物抗體鉭 99.95%,Φ0.5mm電容器用
MR(Mineralocorticoid receptor) 鹽皮質(zhì)激受體抗體高比容鉭粉 30K
MRP1 多藥耐藥相關(guān)蛋白1抗體

詳細(xì)介紹

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:

中文名稱

英文名稱

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

細(xì)胞膜綠色熒光探針(DiO)

DiOC18(3)

10mg

1~3天


商品介紹:

本探針是常用的細(xì)胞膜熒光探針之一,呈現(xiàn)綠色熒光。DiO是一種親脂性膜染料,進(jìn)入細(xì)胞膜后可以側(cè)向擴(kuò)散逐漸使整個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞膜被染色。DiO在進(jìn)入細(xì)胞膜之前熒光非常弱,僅當(dāng)進(jìn)入到細(xì)胞膜后才可以被激發(fā)出很強(qiáng)的熒光。DiO被激發(fā)后可以發(fā)出綠色的熒光,DiO和磷酯雙層膜結(jié)合后的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜參考下圖。其中,大激發(fā)波長為484nm,大發(fā)射波長為501nm。

CAS:34215-57-1

分子式:C53H85ClN2O6

分子量:881.72

DiO可以溶解于無水乙醇、DMSO和DMF,溶解度約為1-2.5mg/ml。發(fā)現(xiàn)較難溶解時(shí)可以適當(dāng)加熱,并用超聲處理以促進(jìn)溶解。

DiO被廣泛用于正向或逆向的,活的或固定的神經(jīng)等細(xì)胞或組織的示蹤劑或長期示蹤劑(long-term tracer)。DiO通常不會明顯影響細(xì)胞的生存力(viability)。DiO對于細(xì)胞膜染色的熒光強(qiáng)度通常要低于DiI,有時(shí)對于某些經(jīng)過固定的組織的染色效果欠佳。

DiO除了簡單的細(xì)胞膜熒光標(biāo)記外,還可以用于檢測細(xì)胞的融合和粘附,檢測發(fā)育或移植過程中細(xì)胞遷移,通過FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)檢測脂在細(xì)胞膜上的擴(kuò)散,檢測細(xì)胞毒性和標(biāo)記脂蛋白等。

用于細(xì)胞膜熒光標(biāo)記時(shí),DiO的常用濃度為1-30μM,常用的濃度為5-10μM。DiO可以直接染色活的細(xì)胞或組織,染色時(shí)間通常為5-20分鐘。對于固定的細(xì)胞或組織,通常宜使用配制在PBS中的4%多聚進(jìn)行固定,使用其它不適當(dāng)?shù)墓潭ㄒ簳?dǎo)致熒光背景較高。

注意事項(xiàng):熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。

儲存條件:4℃避光,有效期一年。

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。

2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測:

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測:

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
無磷二氫鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ambrisentan磷化D酪激衰減蛋白2抗體包裝5g

無磷氫二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ambrisentan磷化D酪激衰減蛋白2抗體包裝1g

無味霉A晶型(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dronedarone HCL膀胱癌缺失基因1包裝1g

無味霉B晶型(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Dronedarone磷化膀胱癌缺失基因1抗體包裝1g

西吡銨(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ranolazine HCl多巴受體D4抗體包裝5g

西洛多辛(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ranolazine HCl橋粒斑蛋白1抗體包裝1g

西米替?。?biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lercanidipine HCl橋粒斑蛋白2抗體包裝250mg

西尼地平(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lercanidipine HCl多巴受體D5抗體包裝5g

西沙必利(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Promethazine Hydrochloride脫氧尿嘧啶三磷核苷解抗體包裝1g

西替利雜質(zhì)A(1-[(4-)基]哌)(標(biāo)準(zhǔn)...英文名稱: Agomelatine多巴受體D3抗體包裝5g

昔萘沙美特羅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Agomelatine誘捕受體3抗體包裝1g

烯酰嗎啉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Piracetam多巴轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白DAT抗體包裝1g

腺嘌呤(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Ramelteon誘捕受體2抗體包裝5g

腺嘌呤核苷(腺苷)(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Lacosamide腫瘤調(diào)亡/死亡受體5抗體包裝1g

腺嘌呤鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱: Milnacipran 核心蛋白聚糖抗體包裝5g

酵母菌Saccharomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于培養(yǎng)微管相關(guān)蛋白2試劑盒三白草;sauchinone

凍土毛霉Mucor│hiemalis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3B試劑盒2-O-alpha-L-鼠李吡喃糖甙鳶尾

青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP,BR,可用于培養(yǎng)微管相關(guān)蛋白1A/1B輕鏈3A試劑盒尚含雞納甙;Quinovin
細(xì)胞膜綠色熒光探針(DiO)宋內(nèi)氏志賀氏51592 1-(2-甲氧基苯基)哌氫鹽RAR相關(guān)孤兒受體γElisa

謝瓦曲霉 2'-溴-4'-氟乙酰苯二肽基肽ⅣElisa

*蜜環(huán) 對羥基苯丁酮抗磷脂IgG抗體Elisa

紫穗槐根瘤 2-羥基環(huán)戊烷羧酸甲酯抗磷脂IgM抗體Elisa

白地霉 3-甲氧苯白抗原FElisa

魯氏不動桿 (R)-(+)-2-芐氧基酸流行性腦膜炎球抗體Elisa

繩狀籃狀 2,3,5-三氯3羧基4甲基5基2呋喃基Elisa

青霉 3-甲基芐人類嗜TⅠ型病IgG抗體Elisa

乳酸乳球乳脂亞種 4,5-二氯-2-甲基噠-3-酮干擾誘導(dǎo)蛋白44Elisa

球孢鏈霉高加索變種 地氯雷他定海藻糖Elisa

產(chǎn)氨短桿 N-甲基環(huán)己酪氨酸蛋白激受體ErbB3Elisa

運(yùn)動發(fā)酵單胞 5-氮雜-3-甲CD33分子Elisa

杜搟氏 1,4,7,10-四氮雜環(huán)十二烷四鹽酸鹽外異蛋白AElisa

豌豆根瘤 1-溴-4,5-二氯-2-(易)核因子紅2相關(guān)因子2Elisa

淡紫灰鏈霉 酸鈉一水合物類固17α羥化Elisa

 


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