詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:糖原磷酸化酶b(GPb)紫外分光光度法
規(guī)格:50管/24樣
測試方法:紫外分光光度法
分類:糖原系列
貨號:GOY-01S6985
客戶自備儀器和試劑
商品介紹:
測定意義 糖原磷酸化酶(Glycogen phosphorylase,GP,EC 2.4.1.1))是糖原分解代謝的關(guān)鍵酶,使糖原分子從非還原端逐個(gè)斷開α-1,4-糖苷鍵移去葡萄糖基,釋放1-磷酸葡萄糖,直至臨近糖原分子α-1,6-糖苷鍵分支點(diǎn)前4個(gè)葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a(GPa)和無活性的糖原磷酸化酶b(GPb)兩種形式。GPb在一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)存在下可被激活。 測定原理: GP催化糖原和無機(jī)磷產(chǎn)生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖,磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步依次催化NADP還原生成NADPH,在340nm下測定NADPH上升速率,即可反映GP活性。添加一定濃度的腺苷酸(5,-AMP)時(shí)測定GP(GPa和GPb)活性,未添加腺苷酸(5,-AMP)時(shí)測定GPa活性,GP活性-GPa活性得到GPb活性。 需自備的儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
特點(diǎn): 1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成 2、靈敏度高,操作便捷 3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑 | 儀器: 1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀(比色測定波長為550nm) 2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃) 3、臺式離心機(jī) 4、漩渦混勻器 5、微量移液器 |
樣品測定的準(zhǔn)備:
1、細(xì)胞、細(xì)菌或組織樣品的制備 :
細(xì)菌或細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),棄上清;按照每100萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次),之后置沸水浴振蕩提取10min;10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。
組織:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;之后置沸水浴振蕩提取10min,10000g,常溫離心10min,取上清,冷卻后待測。
2、血清(漿)樣品:取100μL血清(漿)加入1mL提取液,充分混勻,之后置沸水浴振蕩提取10分鐘,10000g,常溫離心10分鐘,取上清,冷卻后待測。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的處理:稱取1mg,將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋為15、10、8、6、4、2、1、0 μg/ml。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
小鼠胎盤鈣黏蛋白(P-Cadherin)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-乙酰-D-亮氨3-(三氟氧)苯酚 98%2-羥-5-氧苯 98%
小鼠原鈣粘蛋白15(PCDH15)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-乙酰-D-亮氨4-氨-2-吡啶 98%2-羥-6-煙 98%
小鼠平足蛋白(PDPN)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-乙酰-D-亮氨2--4-吡啶 97%3-己炔-2- 97%
小鼠核因子κB2(NFκB2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-乙酰-L-脯氨1,3,5-苯三 98%5-己烯-2- 98.5%
小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-乙酰-L-脯氨4-乙烯吡啶 96% 六-1,3-丁二烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠鼠蛋白(NPHN)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-乙酰-L-脯氨L-谷氨酰 99%六-1,3-丁二烯 97.0%
小鼠性成纖維生長因子(AFGF/FGF1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-乙酰-D-脯氨3-苯 98%正已酯 97%
小鼠成纖維生長因子19(FGF19)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-乙酰-D-脯氨二乙二二丁 99%1H,1H,10H,10H-全氟-1,10-癸二 96%
小鼠成纖維生長因子23(FGF23)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-乙酰-D-脯氨間二苯 99%1-庚炔-3- 97%
小鼠成纖維生長因子受體1(FGFR1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 芴氧羰酰琥珀酰亞二乙二二乙 98%3-羥-2- 98%
小鼠Toll樣受體4(TLR4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒芴氧羰酰琥珀酰亞二乙二二乙 for HPLC, ≥99%1,3-二-2-苯 98%
小鼠Toll樣受體2(TLR-2/CD282)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 芴氧羰酰琥珀酰亞乙二二乙 standard for GC, ≥99.5% (GC)代異戊烷 97%
小鼠降鈣素原(PCT)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 芴氧羰酰琥珀酰亞乙二二乙 CP,95%草鐵(II) 99.999% (metals basis)
小鼠酪氨羥化(TH)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲六氟磷酯乙二二乙 99%乙 AR,98%
小鼠上腺髓質(zhì)素(ADM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲六氟磷酯乙二二 AR,99.5%(GC)1-戊烷 98%,含穩(wěn)定劑銅屑
小鼠Apelin蛋白(APLN)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲六氟磷酯乙二二 for HPLC, 99.5%茚滿 95%
糖原磷酸化酶b(GPb)紫外分光光度法綿羊不均一核糖核蛋白A2/B1 (HNRPA2B1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1-辛-3-咪唑四氟鹽枯草芽孢桿菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
綿羊拮抗凋亡轉(zhuǎn)錄因子(AATF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒1-辛-3-咪唑四氟鹽果生鏈核盤菌拉丁屬名: Monilinia fructicola
綿羊質(zhì)金屬蛋白25(MMP-25)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-溴苯美澳型核果褐腐病菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
綿羊白共同抗原(LCA/CD45)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-溴苯凝結(jié)芽胞桿菌拉丁屬名: Bacillus pumilus
綿羊周期素依賴性激1(CDK1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2-溴苯短小芽孢桿菌拉丁屬名: Torula herbarum
綿羊血小板型磷果糖激(PFKP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒二十四烷酯草色串孢拉丁屬名: Cordyceps sobolifera
綿羊角膜蛋白(KERA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒還原型 S-己-L-谷胱甘肽多座蟲草*注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
綿羊巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒還原型 S-己-L-谷胱甘肽黑木耳拉丁屬名: Aspergillus niger
綿羊水通道蛋白1(AQP-1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 (S)-2-三氟-2-羥黑曲霉拉丁屬名: Arthrobacter subterraneus
綿羊苯諾龍/苯去睪(NP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-地下節(jié)桿菌拉丁屬名: Bacillus amyloliquefaciens
綿羊抗髓磷脂抗體IgA(AMA IgA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2-解淀粉芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus subtilis
綿羊接觸蛋白3(CNTN3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus aryabhattai Shivaji et al
綿羊接觸蛋白4(CNTN4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒9-乙烯蒽注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
綿羊溶菌(LZM)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 9-乙烯蒽小鏈霉菌拉丁屬名: Chaetomium funicola
綿羊衰老關(guān)鍵蛋白5(FBLN5)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-丁2-丁酯繩生毛殼拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
綿羊白分化抗原CD4(CD4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2-丁2-丁酯釀酒酵母注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動(dòng)物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用