商品介紹:
GSK137647A是選擇性FFA4激動劑,作用于人類,小鼠和大鼠FFA4的pEC50分別為6.3,6.2和6.1。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:349085-82-1 別名:GSK 137647 純度:99.98% 分子式:C??H??NO?S 分子量:305.39 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:FFA4激動劑(GSK137647A)
英文名稱:GSK137647A
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
Hymenobacter胰島樣生長因子結(jié)合蛋白5抗體Human RCBTB2 ELISA Kit周期依賴性激4(CDK-4)ELISA Kit
瑞士乳桿菌胰島樣生長因子1抗體Human RCC1 ELISA Kit周期依賴性激2(CDK-2)ELISA Kit
豇豆慢生根瘤菌胰島樣生長因子-II抗體Human RCL1 ELISA Kit周期依賴性激1(CDK-1)ELISA Kit
釀酒酵母白介10抗體Human Recoverin ELISA Kit重組激活基因2(RAG-2)ELISA Kit
蠟狀芽孢桿菌白介13抗體Human Recoverin ELISA Kit重組激活基因1(RAG-1)ELISA Kit
弗氏志賀氏菌白介-17抗體Human RCBTB2 ELISA Kit重去甲腎上腺(NE-B)ELISA Kit
美澳型核果褐腐病菌白介-18/干擾γ誘導(dǎo)因子抗體Human RCC1 ELISA Kit腫瘤血管生長因子(TAF)ELISA Kit
藤黃微球菌白介1受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白抗體Human RCHY1 ELISA Kit腫瘤相關(guān)抗原(TAA)ELISA Kit
單核增生李斯特CMCC(B)54002白介1β/IL-1β抗體Human RBM26 ELISA Kit腫瘤特異性移植抗原(TSTA)ELISA Kit
綠穗霉白介2抗體(大、小鼠)Human ABCB5(ATP-binding cassette sub-family B member 5) ELISA Kit腫瘤特異性生長因子(TSGF)ELISA Kit
尼氏芽孢桿菌白介-2單克抗體Human RBP2 ELISA Kit腫瘤特異性抗原(TSA)ELISA Kit
漢遜德巴利酵母fabryi變種白介-23抗體Human RBM28 ELISA Kit腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)ELISA Kit
香菇(泌陽3號)白介4抗體Human RBM39 ELISA Kit腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)ELISA Kit
球孢白僵菌白介6Human RBM4 ELISA Kit腫瘤壞死因子誘導(dǎo)基因6蛋白(TNFAIP6)ELISA Kit
平臍蠕孢菌白介6抗體Human RBM19 ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子(TWEAK)ELISA Kit
空泡單胞菌白介6抗體Human RBMS1 ELISA Kit腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(TRANCE)ELISA Kit
熒光假單胞菌Pseudomonas│fluorescens 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(N)20(R)
平菇Pleurotus│ostreatus 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)牡荊
焦曲霉Aspergillus│ustus 質(zhì)量規(guī)格:>99.5%(GC),標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)牡荊鼠李糖苷
FFA4激動劑(GSK137647A)CD117/c-kit/SCFR 干生長因子受體/表面分化抗原抗體 分析標(biāo)準(zhǔn)品
phospho-c-kit (Tyr936) 化原癌因c-kit抗體聚烯硫鹽 平均分子量 Mw ~170,000
Phospho-c-Kit (Tyr703) 化原癌因c-kit抗體5-酰核糖-1-焦鈉鹽 80%
Phospho-c-Kit (Tyr719) 化原癌因c-kit抗體菊酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
CD133 antigen 造血干抗原CD133抗體無水亞硫 CP,98.0%
CD137/TNFRSF9 CD137抗體啶 Standard for GC, ≥99.5% (GC)
CD138/Syndecan-1 多配體蛋白聚糖1抗體仲班 99%
CD146/MCAM 黑色瘤粘附分子CD146抗體菲啰 97%