商品介紹:
DGAT1-IN-1是高效DGAT1抑制劑,IC50值低于10nM(Hep3B細(xì)胞過(guò)表達(dá)DGAT1裂解物測(cè)得)。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1449779-49-0 純度:99.83% 分子式:C??H??F?N?O? 分子量:551.56 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
根瘤菌白介1α前肽/IL-1α前肽抗體Human RPS27L ELISA Kit魚類狀腺原(T3)免疫試劑盒
綠毛殼擬毛梭孢變種整合α11抗體Human RPS9 ELISA Kit魚類甲狀腺(T4)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌胰島生長(zhǎng)因子樣家族成員2抗體Human RPS28 ELISA Kit魚類促性腺激釋放激(GnRH)免疫試劑盒
費(fèi)爾氏酵母異戊烯基焦磷異構(gòu)2抗體Human SIGLEC10(Sialic acid-binding Ig-like lectin 10) ELISA Kit魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)免疫試劑盒
釀酒酵母IL-2誘導(dǎo)型T激抗體Human RPS29 ELISA Kit魚類白介1α(IL-1α)免疫試劑盒
大毛霉IGF2基因的互補(bǔ)基因1蛋白抗體Human RPS3 ELISA Kit魚巨噬遷移抑制因子(MIF)免疫試劑盒
稻田彎曲嗜菌干擾誘導(dǎo)蛋白44樣蛋白抗體Human RPS3A ELISA Kit魚金屬硫蛋白2(MT-2)免疫試劑盒
朱黃籃狀菌整合β4抗體Human RPS13(40S ribosomal protein S13) ELISA Kit魚金屬硫蛋白(MT)免疫試劑盒
膠孢kappa輕鏈可變區(qū)抗體Human RPS3A ELISA Kit魚黃體生成(LH)免疫試劑盒
小孢根霉須狀變種誘導(dǎo)協(xié)同激分子CD278抗體Human RPS3 ELISA Kit魚紅生成(EPO)免疫試劑盒
假單胞菌屬白介31抗體Human RPS12 ELISA Kit魚黑色免疫試劑盒
新城疫病白介28A抗體Human RPS12 ELISA Kit魚過(guò)氧化氫(CAT)免疫試劑盒
核盤菌白介32抗體Human RPS4X ELISA Kit魚果糖1,6-二磷免疫試劑盒
芽胞桿菌白介33抗體Human RPS15 ELISA Kit魚骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒
溶淀粉類芽孢桿菌表面免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體Human RPS13(40S ribosomal protein S13) ELISA Kit魚谷胱甘肽過(guò)氧化物(GSH-PX)免疫試劑盒
岸邊亞硫鹽桿菌整合α2抗體Human RPS16 ELISA Kit魚睪(T)免疫試劑盒
: DSM20595ATCC9345CCM5947NCTC8452資源名稱: 溶血隱秘桿菌 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=2%青陽(yáng)參苷元B
匍枝根霉(黑根霉)Rhizopus│stolonifer 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%青陽(yáng)參苷元A
芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,97.5%告達(dá)亭苷元
DGAT1抑制劑(DGAT1-IN-1)CaMK2a 鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗體亞麻酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品
phospho-CaMK2 alpha (Thr286) 化鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗體亞麻酯 standard for GC ,≥99.5% (GC)
phospho-CaMK2 alpha (Tyr231) 化鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2α抗體亞麻酯 99%
Camk1g 鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激IG抗體2--4-異噻唑啉-3-酮 95%
CaMK2 beta 鈣/鈣調(diào)依賴蛋白激2b抗體油酯 >99.0%(GC)
CAP1 CAP1抗體油酯 99%
CAP2 環(huán)化相關(guān)蛋白CAP-2抗體油酯 Standard for GC,≥99%(GC)
CTn1 心肌肌鈣蛋白抗體茉莉酯 98%