詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱:豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)核酸檢測試劑盒
規(guī)格:48T
貨號:GOY-M7076
分類:核酸檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗報告給您。
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌學(xué)中小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
操作流程:
1. 整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3. 每次實(shí)驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6. 為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7. 儀器 擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9. 實(shí)驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人β2糖蛋白(β2-GP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人β2腎上腺素受體抗體(β2-AR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人β1腎上腺素受體抗體(β1-AR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α-銀環(huán)蛇毒素(α-BGT)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α烯醇化酶(α-enolase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α-突觸核蛋白(a-Synuclein)ELISA 試劑盒 組裝/原裝
人α乳清蛋白(α-La)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α羥基丁酸脫氫酶(αHBDH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α-內(nèi)嗎啡肽(α-EP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人α谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶(α-GST)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)核酸檢測試劑盒5637細(xì)胞株
pGEM-3z/618(pGEM3z618)
豬白介素6(IL-6)ELISA Kit
小RNA克隆試劑盒
pQF60
Sodium Bicarbonate Buffer(碳酸氫鈉緩沖液),1M,pH9.0
人超敏C反應(yīng)蛋白(Hs-CRP)ELISA Kit
Sulfurospirillum medium
pET-12a(pET12a)(60908-2775)y
小鼠甲基化酶(MetHylase)ELISA Kit
克隆載體
pSI4
Glucose-Gelatin Veronal Buffer (GGVB)
雞熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA Kit
Mineral medium (nagel and andreesen)