公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:GRK2抑制劑
英文名稱:Paroxetine hydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|100mg|500mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Paroxetine hydrochloride是一種抗抑郁藥,為高效的五羥色胺再攝取抑制劑,能抑制GRK2活性,IC50值為14?μM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:78246-49-8 別名:BRL29060 hydrochloride;BRL29060A 純度:99.40% 分子式:C??H??ClFNO? 分子量:365.83 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
香菇卵磷酯膽固?;D(zhuǎn)移抗體Human PCNXL2 ELISA Kit糖磷脂酰肌(GPI)ELISA Kit
異常漢遜酵母異常變種脂蛋白脂抗體Human PCSK7(Proprotein convertase subtilisin/kexin type 7)ELISA Kit糖鏈抗原19-9(CA19-9)ELISA Kit
榮州假黃單胞菌瘦受體抗體Human PCOLCE2 ELISA Kit糖類抗原72-4(CA72-4)ELISA Kit
釘斑鏈霉菌低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體Human PCP4L1 ELISA Kit糖類抗原50(CA50)ELISA Kit
赭蓋紅菇磷化低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6抗體Human PCP4 ELISA Kit糖類抗原19-9(CA19-9)ELISA Kit
球孢枝孢磷化腫瘤抑制基因LATS1抗體Human ABCG2(ATP-binding cassette sub-family G member 2) ELISA Kit糖類抗原199(CA199)ELISA Kit
芽枝狀枝孢富亮重復(fù)激2抗體Human PCIF1 ELISA Kit糖類抗原125(CA125)ELISA Kit
金黃色葡萄球菌 肺耐藥相關(guān)蛋白抗體Human PCSK7(Proprotein convertase subtilisin/kexin type 7)ELISA Kit糖基化依賴的黏附分子(GlyCAM-1)ELISA Kit
新月彎孢富含亮重復(fù)家庭蛋白3抗體Human PCSK2 ELISA Kit糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA Kit
釀酒酵母富含亮重復(fù)蛋白10抗體Human PDAP1 ELISA Kit糖化血紅蛋白(HbA1C)ELISA Kit
耐賴芽孢桿菌富含亮重復(fù)家庭蛋白2抗體Human PCM1 ELISA Kit糖化低密度脂蛋白(Gly-LDL)ELISA Kit
大腸桿菌富含亮重復(fù)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體Human PDCD10 ELISA Kit糖化蛋白(GSP)ELISA Kit
釀酒酵母層粘連蛋白受體1抗體(C端)Human PCNP ELISA Kit糖化白蛋白(GA)ELISA Kit
磚紅鐮刀菌層粘連蛋白受體1抗體(N端)Human PDCD2(Programmed cell death protein 2) ELISA Kit糖蛋白49A(Gp49a)ELISA Kit
黃曲霉磷化淋巴增強因子-1抗體Human PCNXL2 ELISA Kit糖蛋白130(gp130)ELISA Kit
赫氏埃希氏菌層粘連相關(guān)多肽蛋白1抗體Human PCOLCE2 ELISA Kit糖聚糖(GAG)ELISA Kit
木賊鐮孢Gibberella│intricans Wollenw. 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)人參皂苷Re
黑根霉Rhizopus│niger 質(zhì)量規(guī)格:熒光染料人參皂苷Rc
桔青霉Penicillium│citrinum 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(E)人參皂苷Rh3
GRK2抑制劑Phospho-CRMP-2 (Thr514) 化二氫嘧啶樣2抗體硝鉑溶液 Pt, 15%
CRLR/CGRPR1 降鈣因相關(guān)肽1型受體抗體二溴化鈀 Pd 40 %
SLAMF7/CD319 SLAMF7抗體鈀 Pd 26.2%
CRP C-反應(yīng)蛋白抗體化鈀 Pd 59-60%
CRP C-反應(yīng)蛋白單克隆抗體鉑 98%
CREB-1 環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體氫氧化鈀 AR,99.99%
CREB-1 環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體硫鈀 Pd 51.2%-53.9%
phospho-CREB-1(Ser133) 化CREB-1抗體硫鈀,二水 水 Pd ≥44%