公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:γ-secretase抑制劑(PF-3084014)
英文名稱:PF-3084014
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
PF-3084014是一種可逆的非競(jìng)爭(zhēng)性的選擇性的γ-secretase抑制劑,IC50為6.2nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1290543-63-3 別名:Nirogacestat;PF-03084014 純度:99.95% 分子式:C??H??F?N?O 分子量:489.64 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
大腸埃希菌黑色瘤相關(guān)抗原D1抗體Human ODF2L ELISA Kit神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA Kit
產(chǎn)黃青霉中胚層誘導(dǎo)早期反應(yīng)蛋白2抗體Human NWD1 ELISA Kit神經(jīng)母瘤抗體(NB-Ab)ELISA Kit
繩生毛殼菌MDM2樣P53蛋白結(jié)合抗體Human NVL ELISA Kit神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)ELISA Kit
瓊氏不動(dòng)桿菌RNA相關(guān)結(jié)合蛋白MCG10抗體Human NXN ELISA Kit神經(jīng)降壓(NT)ELISA Kit
Aurantimonas sp.線粒體核糖體蛋白S4抗體Human ODF3 ELISA Kit神經(jīng)激肽B(NKB)ELISA Kit
層臥孔菌緊密連接蛋白MUPP1抗體Human ODZ1 ELISA Kit神經(jīng)穿透1(NPTX-1)ELISA Kit
釀酒酵母肌管相關(guān)蛋白14抗體Human NXPH1 ELISA Kit神經(jīng)保護(hù)因子(CVNPF)ELISA Kit
乳白蘑菇小腦癥基因1/認(rèn)知相關(guān)蛋白抗體Human NUP93 ELISA Kit神經(jīng)(NA)ELISA Kit
聚多曲霉鋅指蛋白60抗體Human NXT2 ELISA Kit上皮中性粒活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA Kit
芽孢桿菌肌球蛋白6抗體Human NUP98-NUP96 ELISA Kit上皮中性?;罨?8(ENA-78)ELISA Kit
綠色木霉肌肉抗體Human NUPL2 ELISA Kit上皮粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA Kit
囊狀匐柄霉代謝型谷受體-3抗體Human NUR77 ELISA Kit上皮黏附分子(Ep-CAM)ELISA Kit
鮑姆針層孔菌促代謝型谷受體2+3抗體Human NUPL1 ELISA Kit上皮特異性抗原(ESA)ELISA Kit
盔形畢赤酵母促代謝型谷受體1+5抗體Human Nurr1/NR4A2 ELISA Kit上皮膜抗原(EMA)ELISA Kit
單胞菌屬MHC I類鏈相關(guān)蛋白A/組織相容性復(fù)合物MHCIa抗體Human NUS1 ELISA Kit傷寒抗原(St-Ag)ELISA Kit
農(nóng)研所芽孢桿菌肌肉特異性環(huán)指蛋白2抗體Human NVL ELISA Kit傷寒抗體(St-Ab)ELISA Kit
蠟樣芽孢桿菌Bacillus│cereus 質(zhì)量規(guī)格:>99.0%(HPLC)西紅花苷I
豬霍亂沙門氏菌Salmonella│cholerae-suis 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)西紅花苷
刺芹側(cè)耳(杏鮑菇)Pleurotus│eryngii 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)煙酰
γ-secretase抑制劑(PF-3084014)DRD4 多巴受體D4抗體二氫 99%
DRD5/Dopamine Receptor D5 多巴受體D5抗體二氫 Kosher, FCC, ≥99%
DBC1 膀胱癌缺失因1二芐 97%
Phospho-DBC1 (Thr454) 化膀胱癌缺失因1二芐 ≥98%, FCC
DBH 多巴β羥化抗體正癸 ≥98%, FCC, FG
DCC 結(jié)腸直腸癌缺失因抗體癸 natural, ≥92%
DCIR/CLEC4A C型凝集結(jié)構(gòu)域家族4成員A抗體庚酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)
DCN/Decorin 核心蛋白聚糖抗體庚酯 CP,97%