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細(xì)胞核提取試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-21 13:08:34瀏覽次數(shù):225

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50T|100T
貨號(hào) GOY-01X9677 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱 Nuclear Extraction Kit
細(xì)胞核提取試劑盒公司*的產(chǎn)品:GDF8 羊抗生長分化因子8/肌肉抑制抗體2,5-二噻吩 98%
GDF-9 生長分化因子9抗體3,4-二氧噻吩 97%
GDNF 膠質(zhì)源性神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體3-氧噻吩 98%
Gelsolin 凝溶膠蛋白抗體2-氧噻吩 99%
GFAP 膠質(zhì)纖維性蛋白抗體2-硝噻吩 98%
GFP 綠色熒光蛋白(免疫組化用抗體)四溴噻吩 99%
GFP 綠色熒光蛋

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;

②生物膜與細(xì)胞器的研究;

③細(xì)胞骨架體系的研究;

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性:

中文名稱:細(xì)胞核提取試劑盒

英文名稱:Nuclear Extraction Kit

產(chǎn)品規(guī)格:50T|100T

發(fā)貨周期:1~3天

商品介紹:

細(xì)胞核提取試劑盒用于從動(dòng)物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的細(xì)胞核。適合于動(dòng)物軟組織(肝或腦組織)和硬組織(肌肉)以及培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞核的制備。其制備物產(chǎn)量高,可以被用于細(xì)胞凋亡、信號(hào)傳遞、代謝和蛋白組學(xué)等的研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶和核酶,性能穩(wěn)定。

操作步驟:

1. 樣本處理

a. 組織勻漿:稱取100~200 mg新鮮組織如肝臟、腦、心肌等,PBS或生理鹽水沖洗,洗凈血水,濾紙吸干,用剪刀剪為碎塊放入小容量玻璃勻漿器內(nèi)。加入1.0 mL預(yù)冷的Lysis Buffer,再加入50μL Reagent A,0℃冰浴中上下研磨組織20次;有未研磨開的組織,可用雙層紗布過濾。

b. 培養(yǎng)細(xì)胞勻漿:消化細(xì)胞,PBS洗滌,800 g 離心5~10 min收集細(xì)胞,計(jì)數(shù)。每次提取需要5 ×107個(gè)細(xì)胞,加入1.0 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer重懸細(xì)胞,再加入50μL Reagent A,將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到小容量玻璃勻漿器內(nèi),0℃冰浴研磨細(xì)胞20~30次。

2. 將組織或細(xì)胞勻漿物轉(zhuǎn)移到1.5mL離心管中,4℃,700g 離心5 min。細(xì)胞核沉淀在收集管底部,棄上清。加入0.5 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer重懸沉淀。

3. 取另一新離心管內(nèi)加入0.5 mL Medium Buffer,吸取上一步的重懸液,沿管壁小心地加入到此離心管中,置于Medium Buffer之上,4℃,700 g 離心5min。細(xì)胞核沉淀在管底。

4. 棄上清,在細(xì)胞核沉淀中加入0.5 mL Lysis Buffer重懸細(xì)胞核沉淀,1000g 離心10min ,棄上清,得到較純的細(xì)胞核沉淀。

5. 用50-100μL Store Buffer 或合適的反應(yīng)緩沖液重懸細(xì)胞核沉淀,立即使用或-70℃保存。

儲(chǔ)存條件:4℃

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

Corin蛋白(CRN)英文名稱:CRN ELISA KitCD80抗體包裝250mg

Cerberus蛋白(CER)英文名稱:CER ELISA KitCD19抗體包裝1g

CD83分子(CD83)英文名稱:CD83 ELISA KitC-C元件趨化因子26抗體包裝250mg

CD5抗原樣蛋白(CD5L)英文名稱:CD5L ELISA Kit5號(hào)染色體開放閱讀框22抗體包裝25g

CD40配體(CD40L)英文名稱:CD40L ELISA Kit鈣激活離子通道4蛋白抗體包裝5g

CD3d分子(CD3d)英文名稱:CD3d ELISA Kit嗜粒趨化蛋白3抗體包裝1g

CD320分子(CD320)英文名稱:CD320 ELISA Kit嗜粒趨化蛋白3抗體包裝250mg

CD30配體(CD30L)英文名稱:CD30L ELISA Kit趨化抗體包裝25g

CD163分子(CD163)英文名稱:CD163 ELISA Kit5號(hào)染色體開放閱讀框55抗體包裝5g

CD14分子(CD14)英文名稱:CD14 ELISA Kit表面趨化因子受體7抗體包裝1g

CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白β(CEBPβ)英文名稱:CEBPβ ELISA Kit色c氧化7A2抗體包裝5g

C4結(jié)合蛋白α(C4BPα)英文名稱:C4BPα ELISA KitCD36抗體包裝100g

B-細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl2)英文名稱:Bcl2 ELISA Kit固合成CYP11B2抗體包裝25g

B-細(xì)胞激活因子受體(BAFFR)英文名稱:BAFFR ELISA Kit7號(hào)染色體開放閱讀框16抗體包裝5g

B-細(xì)胞激活因子(BAFF)英文名稱:BAFF ELISA Kit10號(hào)染色體開放閱讀框62抗體包裝1g

: IFFI2377資源名稱: 黑曲霉 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品乙酰肝試劑盒銀鍛苷;Tiliroside

淡紫擬青霉Paecilomyces│lilacinus (Thom) Samson 質(zhì)量規(guī)格:純度>99%,AR乙酰羧化合成試劑盒印;Indaconitone

IMRUR1547資源名稱: 披發(fā)糖多孢菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品乙酰酯試劑盒鹽黃柏堿;Phellodendrine
細(xì)胞核提取試劑盒香菇 7-溴-2,4(1H,3H)-喹唑啉二酮并殖吸蟲Elisa

美人魚發(fā)光桿美人魚亞種 (E)-3-(叔丁基二甲基硅氧基)烯-1-基-酸頻哪酯鞭毛蟲Elisa

仁果叢梗孢 N-CBZ-甘氨酸乙酯布魯東氏酪氨酸激Elisa

醋化醋桿 3-Boc-6-氧雜-3-氮雜二環(huán)[3.1.0]己烷Wnt-3a蛋白Elisa

尖孢 2,3,6-三氟苯基乙酸低氧誘導(dǎo)因子Elisa

格爾木馬賽 伊班磷酸甘肽Elisa

嗜熱鏈球 苯并[b]噻吩并-3-基酸鼠基因相關(guān)蛋白Elisa

假單胞 3,5-二甲基-吡唑-4-羧酸轉(zhuǎn)化蛋白R(shí)hoA-GTPElisa

綠粘帚霉 Boc-D-精氨酸鹽酸鹽谷氨酸氧化Elisa

平滑白蛋巢 (1S,4S)-2-Boc-2,5-二氮雙環(huán)[2.2.1]庚烷谷氨酸氧化Elisa

冬菇屬 1-苯基-1H-吡唑-4-羧酸β位淀粉樣前體蛋白裂解1Elisa

節(jié)桿 2-氨基-4-苯基酮戊二酸Elisa

灰色鏈霉灰色亞種 B-(6,9-二苯基-9H-咔唑-3-基)酸EB病抗體Elisa

洋蔥伯克霍爾德 3-(二甲氨基)-2-異基烯酸甲酯α淀粉Elisa

膠孢 2-(2-氯-5-苯甲基)-5-(6-氟吡啶-3-基)噻吩膽囊收縮;縮膽囊八肽Elisa


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