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詳細介紹
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
Venetoclax(ABT-199) | 5mg | 1～3天 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：
Venetoclax又稱為ABT-199、GDC-0199，強效的、選擇性的抑制Bcl-2（Ki<0.01 nM），比作用于Bcl-xL和Bcl-w選擇性高4800倍以上。Venetoclax抑制Bcl-2依賴的細胞生長，并抑制體內(nèi)移植瘤生長。Venetoclax表現(xiàn)出抗白血病活性。 【該產(chǎn)品僅用于科研實驗，不能用于人體】 靶點：Bcl-2 外觀：粉末 純度：≥98% 溶解性：溶于DMSO（50 mg/ml） 儲存條件：-20℃，有效期24個月 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
甘露聚糖結合凝集關聯(lián)絲蛋白1(MASP1)英文名稱：MASP1 ELISA Kit磷化抑癌基因p16抗體包裝1g
甘脫氫(GLDC)英文名稱：GLDC ELISA Kit磷化抑癌基因p16抗體包裝25g
鈣網(wǎng)蛋白(CRT)英文名稱：CRT ELISA Kit磷化CREB-1抗體包裝5g
鈣離子轉運ATPB2(ATP2B2)英文名稱：ATP2B2 ELISA Kit磷化粒-巨噬集落激因子受體β抗體包裝1g
鈣離子轉運ATPA2(ATP2A2)英文名稱：ATP2A2 ELISA Kit磷化N-鈣粘附分子抗體包裝25g
鈣非依賴性磷脂A2(iPLA2)英文名稱：iPLA2 ELISA Kit磷化后期促進復合蛋白3抗體包裝5g
鈣蛋白抑制蛋白(CAST)英文名稱：CAST ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝100g
鈣蛋白10(CAPN10)英文名稱：CAPN10 ELISA Kit磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝25g
鈣蛋白1(CAPN1)英文名稱：CAPN1 ELISA Kit9號染色體開放閱讀框75抗體包裝25ml
復制啟動因子1(REPIN1)英文名稱：REPIN1 ELISA KitCD4抗體包裝5ml
輔肌動蛋白α2(ACTN2)英文名稱：ACTN2 ELISA Kit血小板糖蛋白GPIb抗體包裝1g
封閉蛋白3(CLDN3)英文名稱：CLDN3 ELISA Kit蛋白精N基4抗體包裝1g
封閉蛋白2(CLDN2)英文名稱：CLDN2 ELISA Kit磷化蛋白精N基4抗體包裝25g
分泌性白細胞蛋白抑制因子(SLPI)英文名稱：SLPI ELISA Kit磷化周期依賴性激6抗體包裝5g
分泌型卷曲相關蛋白5(SFRP5)英文名稱：SFRP5 ELISA Kit磷化原癌基因CBL2抗體包裝100mg
細鏈格孢Alternaria│tenuis Nees 質量規(guī)格：>98%,標準品載脂蛋白A4試劑盒遠華蟾蜍精;ocinobufagi
小孢根霉華變種Rhizopus│microsporus var. chinensis 質量規(guī)格：含量>99.0%，無載脂蛋白A2試劑盒氧化槐定堿;Oxysophoridine
香菇Lentinula│edodes 質量規(guī)格：HPLC>99%,標準品載脂蛋白A1試劑盒薏苡;Coixol
Bcl-2抑制劑(GDC-0199)畢赤酵母 (R)-3-(3-甲基丁酰)-4-芐基-2-惡唑烷酮CCDC49抗體Elisa
解淀粉芽孢桿 2-羥甲基噻唑天門冬氨酸氨基轉移Elisa
冠突曲霉 5-噻唑甲酸甲酯葡萄糖轉運蛋白4Elisa
廈門交替紅色桿 噻唑-4-羧酸乙酯型肝炎病IgM抗體Elisa
喜濕小脆柄菇 5-溴-2-(溴甲基)吡啶早孕因子蛋白Elisa
粘紅酵母 2-基噻唑巨噬炎性蛋白Elisa
根瘤 2,2’-硫代雙(對叔辛基苯酚)鎳-正丁絡合物布魯氏IgG抗體Elisa
美澳型核果褐腐病 五羰基溴化錳(I)布魯氏IgM抗體Elisa
節(jié)桿 N-(5-氯-2-吡啶基)雙(三氟磺酰亞)α-N-乙?；肴樘擒誆lisa
魯氏毛霉 Fmoc-L-天冬氨酸 4-甲酯維生D結合蛋白Elisa
空泡單胞 5-氧基-4-甲基-1,2,4-三唑啉酮四旋蛋白1Elisa
狹窄革 2,6-二氟-3-甲氧基苯小亞基鈣蛋白2Elisa
梨生殼囊孢 4-氯-3,5-二氟苯小亞基鈣蛋白1Elisa
米曲霉 3-氯肉桂酸半胱氨酸蛋白抑制劑4Elisa
潘諾尼亞鎖霉 4-(1-羥基-1-甲基乙基)-2-基-1H-咪唑-5-羧酸乙酯凝血因子XIII A1Elisa
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