γ-secretase抑制劑(DAPT)公司*的產(chǎn)品：Anti-EphA4/FITC 熒光素標(biāo)記抗酪氨酸蛋白激酶A4抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Phospho-MSK1 (Ser376) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus a

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：γ-secretase抑制劑(DAPT)

英文名稱：DAPT

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

粘著劍菌線粒體鈉/氫交換蛋白質(zhì)2抗體Human CEBPD(CCAAT/enhancer Binding Protein(C/EBP), delta) ELISA Kit人抗紅抗體(RBC)ELISA Kit

喇叭菌神經(jīng)元1抗體Human BAX(Apoptosis regulator BAX) ELISA Kit人抗核周因子抗體(APF)ELISA Kit

豆芽菌1-2神經(jīng)肽Y抗體Human MAPK1(Mitogen-activated protein kinase 1) ELISA Kit人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA Kit

枯草芽孢桿菌神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體Human CTLA4(Cytotoxic T-lymphocyte protein 4) ELISA Kit人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)ELISA Kit

球孢白僵菌谷受體2B抗體Human CEACAM1(Carcinoembryonic antigen-related cell adhesion molecule 1) ELISA Kit人抗核糖核蛋白抗體(RNP-Ab)ELISA Kit

單胞菌屬神經(jīng)纖毛蛋白2抗體Human C9(Complement component C9) ELISA Kit人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA Kit

枯斑擬盤多毛孢谷受體2D抗體Human BCL11B(B-cell lymphoma/leukemia 11B) ELISA Kit人抗核仁抗體(ANA)ELISA Kit

香栓孔菌原癌基因N-Ras抗體Human CCL28(C-C motif chemokine 28) ELISA Kit人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA Kit

耐鹽考克氏菌T激活核轉(zhuǎn)錄因子4抗體Human NPS(Neuropeptide S) ELISA Kit人抗核抗體(ANA)ELISA Kit

地下鹽單胞菌腦低密度脂蛋白受體蛋白1抗體Human GSK3β(Glycogen synthase kinase-3 beta) ELISA Kit人抗骨骼肌抗體(ASA)ELISA Kit

蘇云金芽孢桿菌軸突蛋白2抗體Human CD28(T-cell-specific surface glycoprotein CD28) ELISA Kit人抗弓形體IgM抗體(anti-tox IgM)ELISA Kit

殼菌腎小球粘附分子受體抗體Human APOA2(Apolipoprotein A-II) ELISA Kit人抗高爾基體抗體(AGAA)ELISA Kit

變粉紅鎖擲孢酵母神經(jīng)生長調(diào)節(jié)蛋白1抗體Human CD276(CD276 antigen) ELISA Kit人抗肝膜抗體(LMA)ELISA Kit

污黑腐皮殼軸突生長誘向因子G2抗體Human CTSL2(Cathepsin L2) ELISA Kit人抗肝胞質(zhì)1型抗體(LC1)ELISA Kit

類干酪乳桿菌黑色瘤硫軟骨蛋白多糖4抗體Human COR(Cortisol) ELISA Kit人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA Kit

金黃色葡萄球菌NDST1蛋白抗體Human GSK3β(Glycogen synthase kinase-3 beta) ELISA Kit人抗肝PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體-IgM(HIT)ELISA Kit

彎曲芽孢桿菌Bacillus│flexus 質(zhì)量規(guī)格：>250U/mg,BR苦杏仁苷

芽孢桿菌屬Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>2500U/MG絞股藍(lán)皂苷

雅致放射毛霉Actinomucor│elegans 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR金絲桃
γ-secretase抑制劑(DAPT)Phospho-FHIT (Tyr114)  化脆性組氨三聯(lián)體抗體銦 SP

G protein beta subunit GI  G蛋白/鳥苷結(jié)合蛋白抗體鉛 flakes,SP

SLK/Fyn  酪氨蛋白激Fyn（同步原癌因）抗體鉛 99.99%,powder

GABA  兔抗γ1氨丁抗體鉛 99.999%，粒狀，1-3mm

Gab1  接頭蛋白Gab 1抗體水質(zhì)鉛標(biāo)樣 1.0mg/l,分析標(biāo)準(zhǔn)品

Phospho-Gab1 (Tyr627)  化接頭蛋白Gab 1抗體高純硫 99.99% metals basis

Phospho-Gab1 (Tyr659)  化接頭蛋白Gab 1抗體高純硫 99.999% metals basis

Gab2  接頭蛋白Gab 2抗體高純硫 分析標(biāo)準(zhǔn)品 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)