以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
cysteine protease抑制劑 | Cysteine Protease inhibitor | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
Cysteine Protease inhibitor是半胱氨酸蛋白酶(cysteine protease)抑制劑。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:921625-62-9 別名:2-Pyrimidinecarbonitrile, 4-[[4-(aminomethyl)[1,1-biphenyl]-3-yl]oxy]- 純度:97.14% 分子式:C??H??N?O 分子量:302.33 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
Rhizobium alkalisoliHHIP蛋白抗體Human SKIV2L2 ELISA Kit大鼠CD8分子(CD8)免疫試劑盒
節(jié)桿菌亞鐵氧化抗體Human SKIL ELISA Kit大鼠CD68分子(CD68)免疫試劑盒
所多瑪鹽紅菌鳥苷釋放因子p532蛋白抗體Human SKIV2L ELISA Kit大鼠CD63分子(CD63)免疫試劑盒
山梨木糖假絲酵母HERC2 E3泛蛋白連接抗體Human SIN3A ELISA Kit大鼠CD4分子(CD4)免疫試劑盒
陽還原地桿菌HERC3 E3泛蛋白連接抗體Human SKP1 ELISA Kit大鼠CD45分子(CD45)免疫試劑盒
稻梨孢HERC4 E3泛蛋白連接抗體Human MUC12(Mucin-12) ELISA Kit大鼠CD44分子(CD44)免疫試劑盒
赤霉菌HERC6 E3泛蛋白連接抗體Human SIP1 ELISA Kit大鼠CD34分子(CD34)免疫試劑盒
核黃德沃斯氏菌MMF誘導(dǎo)片段蛋白1抗體Human SIGLEC6 ELISA Kit大鼠CD30分子(CD30)免疫試劑盒
豇豆慢生根瘤菌HERPUD蛋白家族成員2抗體Human SIGLEC7 ELISA Kit大鼠CD19分子(CD19)免疫試劑盒
蘇云金芽孢桿菌尿黑氧化抗體Human SIGLEC9 ELISA Kit大鼠CD117分子(CD117)免疫試劑盒
土壤伯克氏菌肝生長調(diào)節(jié)因子酪激底物抗體Human SIGMAR1 ELISA Kit大鼠CC趨化因子受體9(CCR9)免疫試劑盒
黑曲霉T2識別黑色瘤抗原抗體Human SIKE1 ELISA Kit大鼠C-C趨化因子6(CCL6)免疫試劑盒
亮白曲霉肝癌HHCM蛋白抗體Human SIL1 ELISA Kit大鼠CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白α(C/EBPα)免疫試劑盒
黃曲霉紫外切除修復(fù)蛋白RAD23A抗體Human SHOX ELISA Kit大鼠B因子(BF)免疫試劑盒
黃色毛霉紫外切除修復(fù)蛋白RAD23B抗體Human SH3GL2 ELISA Kit大鼠B淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫試劑盒
小紅酵母3-羥基異丁脫氫抗體Human SIM2 ELISA Kit大鼠Bκ輕肽基因增強(qiáng)子抑制因子,激β (IKBKB)免疫試劑盒
大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=2%人參皂苷CK
肺炎鏈球菌Streptococcus│pneumoniae 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=4%人參皂苷F2
橄欖鏈霉菌Streptomyces│olivaceus 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.5%人參皂苷F1
cysteine protease抑制劑ATM 毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體固紅TR半化鋅鹽 90%
ATP2c1 鈣離子ATP通道蛋白抗體固紫B鹽 80%
phospho-ATM(Ser1981) 化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體N-酰-L-硫氨酰-L-白氨酰-L苯氨 97%
ATF6 活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體(S)-(-)-2-酰琥珀酐 90%,工業(yè)級
ATP4B 氫ATP通道蛋白抗體D-果糖-6-二鈉,二水 98%
ATP5J ATP5J抗體鈣熒光探針FIuo,3-AM 70%
ATP7A 銅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)α鏈抗體熒蒽 分析標(biāo)準(zhǔn)品
ATRN 吸引抗體D-半乳糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品