公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:caspase抑制劑(EP1013)
英文名稱:EP1013
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
EP1013是一種廣譜的caspase選擇性抑制劑,可用于1型糖尿病研究。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):223568-55-6 別名:F1013 純度:97.76% 分子式:C??H??FN?O? 分子量:382.38 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
細(xì)枝孢磷化中心粒蛋白Nudel抗體Human CASP3(Caspase-3) ELISA Kit晶體蛋白β(Cryβ)ELISA Kit
嗜中溫寒冷桿菌類固脫氫樣蛋白NSDHL抗體Human CYCS(Cytochrome c) ELISA Kit晶體蛋白α(Cryα)ELISA Kit
弓形蟲(chóng)(NT株)磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human APOA1(Apolipoprotein A-I) ELISA Kit緊密連接蛋白1(ZO1)ELISA Kit
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌磷化1型神經(jīng)纖維瘤抗體Human NOS1/nNOS(Nitric oxide synthase, brain) ELISA Kit金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1(ADAMTS1)ELISA Kit
短短芽孢桿菌磷化谷受體2B抗體Human APOC1(Apolipoprotein C-I) ELISA Kit金屬硫蛋白2(MT-2)ELISA Kit
根瘤菌磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human PDGFB(Plaet-derived growth factor subunit B) ELISA Kit金屬硫蛋白2(MT2)ELISA Kit
漢遜德巴利酵母磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human APCS(Serum amyloid P-component) ELISA Kit金屬硫蛋白(MT)ELISA Kit
根瘤菌磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human CASP1(Caspase-1) ELISA Kit金葡菌腸(SE)ELISA Kit
銀灰口蘑磷化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human CDH5(Cadherin-5) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白9(ADAM9)ELISA Kit
亮白曲霉磷化IKB α抗體Human IFNW1(Interferon omega-1) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白8(ADAM8)ELISA Kit
磷化IKB alpha抗體Human DLK-1(Protein delta homolog 1) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白33(ADAM33)ELISA Kit
毛頭鬼傘(雞腿菇)磷化核因子活化T胞漿蛋白2抗體Human SOST(Sclerostin) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白19(ADAM19)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌還原型輔Ⅱ氧化5/煙酰腺嘌呤二核苷磷抗體Human PYY(Peptide YY) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白15(ADAM15)ELISA Kit
楊葉點(diǎn)霉增殖相關(guān)蛋白NANOS2抗體Human ANGPTL3(Angiopoietin-related protein 3) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白12(ADAM12)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體Human ACO1(Aconitase 1) ELISA Kit解整合樣金屬蛋白10(ADAM10)ELISA Kit
露濕漆斑菌磷化核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體Human AOC3(Membrane primary amine oxidase) ELISA Kit解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA Kit
南方鹽單胞菌Halomonas│meridiana 質(zhì)量規(guī)格:1500USP u/mg,豬源絡(luò)塞維
出芽短梗霉=出芽茁霉(黑酵母)Aspergillus│pullulans 質(zhì)量規(guī)格:95%,美國(guó)進(jìn)口原裝絡(luò)塞琳
粘質(zhì)沙雷菌Serratia│marcescens 質(zhì)量規(guī)格:>45 U/mg,進(jìn)分紅景天苷
caspase抑制劑(EP1013)Gax 生長(zhǎng)終止特異性同源盒因抗體2-硫代 98%
GCN2 蛋白激GCN2蛋白抗體間二苯 99.0%
Phospho-GCN2 (Thr898) 化蛋白激GCN2蛋白抗體2,2'-雙噻吩 98%
phospho-GCN2 (Thr667) 化蛋白激GCN2蛋白抗體3-丁噻吩 98%
GCP-2 粒趨化蛋白2抗體2-溴-3-己噻吩 98%
CXCL7/NAP-2/PPBP 中性粒趨化蛋白2抗體2-溴-3-十二烷噻吩 95%
CXCL9 γ干擾誘導(dǎo)單核因子抗體3-噻吩 98%
CXCL11 干擾誘導(dǎo)T趨化因子抗體2--3-溴噻吩 97%