公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱(chēng):ACC抑制劑(PF-05175157)
英文名稱(chēng):PF-05175157
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
PF-05175157是一種廣譜乙酰輔FUA羧化酶(ACC)抑制劑,對(duì)ACC1(human),ACC2(human),ACC1(rat)和ACC2(rat)的IC50值分別為27.0,33.0,23.5和50.4nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1301214-47-0 純度:96.13% 分子式:C??H??N?O? 分子量:405.49 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
金針菇(毛柄金錢(qián)菌、冬菇)N-乙?;D(zhuǎn)移2抗體Human APOH(Beta-2-glycoprotein 1) ELISA Kit睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)ELISA Kit
宇佐美曲霉富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體Human FST(Follistatin) ELISA Kit結(jié)核菌(Tuberculin)ELISA Kit
熱栗色鏈霉菌孤兒核受體TAK1抗體Human AKT1(RAC-alpha serine/threonine-protein kinase) ELISA Kit結(jié)核菌桿抗體IgM(TB-Ab IgM)ELISA Kit
玉米黑粉菌骨巢蛋白抗體Human COL15A1(Collagen alpha-1 XV) ELISA Kit結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)ELISA Kit
峨眉山鏈霉菌軸突生長(zhǎng)誘向因子5抗體Human SERPINE1(Plasminogen activator inhibitor 1) ELISA Kit結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit
球孢白僵菌磷化p-IκB-α抗體Human PDGFC(Plaet-derived growth factor C) ELISA Kit結(jié)合珠蛋白(HPT)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌G21蛋白質(zhì)抗體Human INHA(Inhibin alpha chain) ELISA Kit結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)ELISA Kit
暗黃紫鏈霉菌醌氧化還原抗體Human FGF2(Heparin-binding growth factor 2) ELISA Kit結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA Kit
枯草芽孢桿菌神經(jīng)肽Y1受體抗體Human KitLG(Kit ligand) ELISA Kit結(jié)蛋白(Des)ELISA Kit
淺紫灰鏈霉菌產(chǎn)色變種谷受體1抗體Human TIE1(Tyrosine-protein kinase receptor Tie-1) ELISA Kit結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA Kit
佛羅里達(dá)側(cè)耳谷受體調(diào)節(jié)蛋白2抗體Human TNFSF10(Tumor Necrosis Factor Related Apoptosis Inducing Ligand) ELISA Kit窖蛋白(Cav-1)ELISA Kit
溶血 水解1抗體Human CGA(Chromogranin A) ELISA Kit角化生長(zhǎng)因子(KGF)ELISA Kit
雅致小克銀漢霉神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白抗體Human FTH1(Ferritin heavy chain) ELISA Kit角化內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA Kit
馬爾他布魯氏菌核孔蛋白50抗體Human FTL(Ferritin light chain) ELISA Kit膠轉(zhuǎn)蛋白(TAGLN)ELISA Kit
鴨疫里氏桿菌軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子-A抗體Human AMH(Muellerian-inhibiting factor) ELISA Kit膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)ELISA Kit
乳糖細(xì)黃鏈霉菌一氧化氮合成-1抗體(神經(jīng)型)Human RORC(Nuclear receptor ROR-gamma) ELISA Kit膠質(zhì)源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(GDNF)ELISA Kit
嗜熱嗜脂肪地芽孢桿菌Geobacillus│stearothermophilus 質(zhì)量規(guī)格:7-15 units/mg,來(lái)源于地衣芽孢桿菌黃楊堿
牛鏈球菌Streptococcus│bovis 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR丁香酚
喜溫硫桿狀菌Acidithiobacillus│caldus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品黃芪皂苷III
ACC抑制劑(PF-05175157)CXCL13/BCA1 B-淋巴趨化因子抗體5,5'-二溴-2,2'-聯(lián)噻吩 99%
CXCL15/Lungkine 趨化因子CXCL15抗體2,3-二溴噻吩 98%
GCK/Glucokinase 葡萄糖激抗體2,5-二溴-3-己噻吩 97%
GCS 谷氨半胱氨γ合成抗體2,5-二溴-3-辛噻吩 96%
CSF3 粒-巨噬集落激因子3抗體2,5-二溴-3,4-二硝噻吩 98%
G-CSFR 粒-巨噬集落激因子3受體抗體2,5-二溴-3-十二烷噻吩 97%
GDF-1 生長(zhǎng)、分化因子1抗體3-十二烷噻吩 98%
GDF8/MSTN 生長(zhǎng)分化因子8抗體2,5-二溴-3-丁噻吩 96%