Hoechst 33258細(xì)胞藍(lán)色熒光染料公司正在出售的產(chǎn)品：ATF2 活化復(fù)制因子2抗體核黃素-5′-鈉鹽水合物 73-79%(HPLC)
phospho-ATF2(Ser490/498) 化活化復(fù)制因子2抗體戊菊酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，100%
phospho-ATF2(Thr69/71) 化活化復(fù)制因子2抗體脒鹽鹽 96%
ATF3 活化轉(zhuǎn)錄因子3抗體(+)-葑酮 standard for

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

免疫球蛋白A(IgA)英文名稱：IgA ELISA Kit磷化促腎上腺皮質(zhì)激ACTH抗體包裝25mg

輪狀病毒(RV)抗原(Ag)英文名稱：Ag ELISA Kit磷化蛋白激AKT1抗體包裝25g

卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)英文名稱：OVA sIgG ELISA Kit磷化蛋白激B抗體包裝1g

卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)英文名稱：OVA sIgE ELISA Kit磷化鈉ATP蛋白a1抗體包裝100g

卵泡抑(FS)英文名稱：FS ELISA Kit磷化內(nèi)收蛋白a1抗體包裝25g

硫氧化還原蛋白(Trx)英文名稱：Trx ELISA Kit磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗體包裝1g

硫氧還蛋白還原(TrxR)英文名稱：TrxR ELISA Kit磷化腺苷單磷活化蛋白激α2抗體包裝250mg

磷脂酰絲(PS)英文名稱：PS ELISA Kit性神經(jīng)酰1抗體包裝1g

磷脂酰肌抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)英文名稱：PI Ab-IgG/IgM ELISA Kit粘附調(diào)節(jié)分子1抗體包裝1g

磷脂酰肌蛋白聚糖3(GPC-3)英文名稱：GPC-3 ELISA Kit氣味結(jié)合蛋白抗體包裝5g

磷脂D2(PLD2)英文名稱：PLD2 ELISA Kit乙脫氫2抗體包裝1g

磷脂A2(PL-A2)英文名稱：PL-A2 ELISA Kit膜粘連蛋白10抗體包裝1g

磷脂肌3激(PI3-K)英文名稱：PI3-K ELISA Kit前梯度同源蛋白2抗體包裝250mg

磷腺苷(cAMP)英文名稱：cAMP ELISA Kit乙脫氫5抗體包裝100g

磷烯式羧激(PCK)英文名稱：PCK ELISA Kit通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體包裝25g

ATP結(jié)合蛋白家族7抗體免疫球蛋白G(IgG)Torezolid (TR-701; tedizolid) is a novel oxazolidinone for gram-positive infecti
Hoechst 33258細(xì)胞藍(lán)色熒光染料白僵 2,3-二甲氧基成熟促進(jìn)因子檢測試劑盒

卡卡杜兒玉氏酵母 苯甲酰甲酸甲酯成纖維活化蛋白檢測試劑盒

釀酒酵母 氨基乙硫酸氫鹽成纖維生長因子檢測試劑盒

黑曲霉 4-嗎啉成纖維生長因子10檢測試劑盒

阿穆爾斯克灣鹽地桿 磷酸三聚成纖維生長因子19檢測試劑盒

簇生離褶傘 4-氨基-2-羥基嘧啶-5-羧酸乙酯成纖維生長因子21檢測試劑盒

蓋囊側(cè)耳 4-溴-5-氯-2-氟甲苯成纖維生長因子23檢測試劑盒

草類芽孢桿 2,6-二溴吡啶-4-羧酸程序性死亡分子-1檢測試劑盒

鍺栓孔 甘氨酸亞鐵程序性死亡配體-1檢測試劑盒

平菇 3-甲基-2-(4-)丁酸穿孔蛋白1檢測試劑盒

群結(jié)腐霉 5-溴-1H--3-甲垂草扁桃酸檢測試劑盒

非食用色素俾士麥棕對照液 (4-甲氧苯基)肼垂體中葉素檢測試劑盒

毛柄(金針菇) 4-氯-5-甲基-2氨基嘧啶雌二檢測試劑盒

釀酒酵母 4-溴-3-羥基苯甲雌檢測試劑盒

白耙齒 4-硝基-1,3-苯二硫酸鹽雌受體檢測試劑盒