詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時,提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng)、錯配率低等優(yōu)點。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增,提高PCR的準(zhǔn)確性。
中文名稱:葡萄孢菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Botrytis cinerea ?
貨號:GOY-M3748
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動 DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動 Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時,只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴(kuò)增。
樣品要求及注意事項:
1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進(jìn)行評估。
4、 實時熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計,熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個循環(huán),收集一個熒光強(qiáng)度信號,這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實時熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
甘氨酰-脯氨酰-對硝基苯胺對苯磺酸鹽5945-50-6彈性蛋白檢測試劑盒
五肽促胃液素521-88-0膽酸檢測試劑盒
O-(IH-苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四基異脲六氟化磷2643-85-8膽囊收縮素/縮膽囊素八肽檢測試劑盒
L-高精氨酸鹽酸鹽4429-63-4膽囊收縮素/腸促胰酶肽檢測試劑盒
甘氨酸絡(luò)合鋅33889-69-9膽堿轉(zhuǎn)運體樣蛋白4檢測試劑盒
甘氨酸鎂螯合物29782-68-1膽堿酰轉(zhuǎn)移酶檢測試劑盒
甘氨酸鈣螯合物22888-70-6膽紅素氧化代謝物 ELISA試劑盒
DL-3-氨基正酸66-76-2膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白檢測試劑盒
DL-3-氨基異酸24939-16-0膽固醇7α-羥化酶檢測試劑盒
DL-α-氨基異酸33171-05-0膽固醇檢測試劑盒
葡萄孢菌探針法熒光定量PCR試劑盒鹽酸DL-精氨酸71939-50-9單絲氨酸蛋白激酶1檢測試劑盒
L-精氨酸L-天門冬氨酸13739-02-1單核細(xì)胞趨化蛋白4檢測試劑盒
L-精氨酸-L-谷氨酸鹽625-04-7單核細(xì)胞趨化蛋白3檢測試劑盒半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗原 焦棓酚紅
AIPMonkey BMF (Bcl-2 Modifying Factor) ELISA Kit
神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原) 3-沒食子?;鼘幩?/span>
AIBMEMonkey C1q (Complement 1q) ELISA Kit
重組生長分化因子8/肌肉抑制素 帕克醇
AIBIMonkey CTSD (Cathepsin D) ELISA Kit
神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原) 乳清蛋白
AIBAMonkey FBN3 (Fibrillin 3) ELISA Kit
神經(jīng)生長因子受體的一種(抗原) 三七皂苷T5
AgDDTCMonkey BDNF(Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit
促狀腺素受體(抗原) 佛波醇
Aerosol OTMonkey sTfR1 (Soluble Transferrin Receptor1) ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡介
公式:
優(yōu)點:分析簡單,實驗優(yōu)化簡單
缺點:對每一個基因,每一輪實驗都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。