詳細(xì)介紹
熒光定量PCR試劑盒:
Real Time PCR EasyTM-SYBR Green I試劑盒提供的2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR是一種使用SYBR Green I進(jìn)行Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)的全新預(yù)混系統(tǒng),能大幅度提高產(chǎn)物特異性和反應(yīng)靈敏度。同時(shí),提供ROX作為內(nèi)參染料。該試劑盒的熒光強(qiáng)度為同類產(chǎn)品的3-5倍,能更靈敏的、更直觀的反應(yīng)目的模板DNA的濃度。
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR包含本公司*的熱啟動(dòng)Foregene Taq DNAPolymerase,該酶相對于普通Taq酶具有擴(kuò)增效率高、特異性擴(kuò)增能力強(qiáng)、錯(cuò)配率低等優(yōu)點(diǎn)。用于熒光定量PCR反應(yīng)可減少非特異性擴(kuò)增,提高PCR的準(zhǔn)確性。
中文名稱:皮炎芽生菌探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱:Blastomyces dermatitidis
貨號:GOY-M3730
規(guī)格:50T
產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。
試劑盒內(nèi)容:
Store at -20°C
2× Real PCR EasyTM Mix-SYBR:包括特別改造的熱啟動(dòng) Taq DNAPolymerase、MgCl2、優(yōu)化配比的 dNTPs 和 SYBR Green I、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)增強(qiáng)劑、優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑等。PCR 反應(yīng)時(shí),只需將適當(dāng)?shù)牧呀饣旌弦?、引物、DNase-ddH2O添加到2×Real PCR EasyTM Mix-SYBR中即可用于PCR反應(yīng)。
ROX Reference Dye:一般用于 ABI、Stratagene 等公司的 Real Time PCR 擴(kuò)增儀上,用于調(diào)整 PCR 加樣誤差所引起的 PCR 管與管之的差異。不同儀器所需ROX Reference Dye 濃度不同,用戶可以根據(jù)儀器的推薦濃度添加。DNase-Free ddH2O:超純水,用于 PCR 反應(yīng)。
試劑盒應(yīng)用
熒光定量PCR進(jìn)行模板定量分析。
常規(guī)PCR擴(kuò)增。
樣品要求及注意事項(xiàng):
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運(yùn)輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動(dòng)植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動(dòng)植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進(jìn)行評估。
4、 實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。
熒光定量PCR原理:
熒光定量PCR早稱TaqMan PCR,后來也叫Real-Time PCR,是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術(shù)。該技術(shù)是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光標(biāo)記探針或相應(yīng)的熒光染料來實(shí)現(xiàn)其定量功能的。其原理:隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行,PCR反應(yīng)產(chǎn)物不斷累計(jì),熒光信號強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán),收集一個(gè)熒光強(qiáng)度信號,這樣我們就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖。
一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化。而在平臺期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級的增加,PCR 的終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,根據(jù)終的 PCR 產(chǎn)物量也不能計(jì)算出起始 DNA 拷貝數(shù)。只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段, PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,我們可以選擇在這個(gè)階段進(jìn)行定量分析。為了定量和比較的方便,在實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 技術(shù)中引入了兩個(gè)非常重要的概念:熒光閾值和 CT值。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
緩激肽B2受體抗體61825-98-7谷氨酸脫羧酶自身抗體IgG檢測試劑盒
軸蛋白1Axin protein 1抗體490-96-0谷氨酸脫羧酶65檢測試劑盒
自分泌運(yùn)動(dòng)因子抗體144606-84-8谷氨酸脫羧酶65檢測試劑盒
極光激酶B抗體144606-83-7谷氨酸脫羧酶檢測試劑盒
程序性死亡配體2抗體135557-67-4谷氨酸受體檢測試劑盒
磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體117047-76-4谷氨酸谷草轉(zhuǎn)氨酶2,線粒體檢測試劑盒
皮炎芽生菌探針法熒光定量PCR試劑盒蛇巴曲酶抗體92233-55-1谷氨酸-半胱氨酸連接酶調(diào)節(jié)亞基檢測試劑盒
Bax(小鼠來源抗體)16198-01-9谷氨酸[NMDA]受體亞基ε-2檢測試劑盒
Bcl-xL蛋白抗體58546-55-7谷氨酸[NMDA]受體亞基ε-2檢測試劑盒
p53正向細(xì)胞凋亡調(diào)控因子抗體64917-83-5孤腓肽檢測試劑盒
抗磷酸化Bcl-xL(pSer62)蛋白抗體64938-51-8鉤端螺旋體IgM檢測試劑盒
酰膽堿脂酶抗體(N端)82425-45-4鉤端螺旋體IgG檢測試劑盒
抗酰膽堿脂酶單克隆抗體61281-37-6弓蛔蟲檢測試劑盒ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗原 烏沙苷元洋地黃苷
Antifoam OED24KMonkey PP (Pancreatic Polypeptide) ELISA Kit
精氨酸加壓素受體2抗原 鴨腳木堿
AnthroneMonkey NUP98 (Nucleoporin 98kDa) ELISA Kit
極光激酶B抗原 早熟素Ⅱ
Anthraquinone-2-sulfonic acid sodium salt monohydrateMonkey GA (Glycated Albumin) ELISA Kit
孤菲肽(痛敏肽)(抗原) N-阿魏酰真蛸胺; N- 阿魏酰章魚胺
AnthraquinoneMonkey PI3K2α (Phosphoinositide-3-Kinase Class-2-Alpha Polypeptide) ELISA Kit
程序性死亡配體1(多肽) N-對香豆酰真蛸胺
AnisomycinMonkey ATGA/TGAB (Anti-Thyroid-Globulin Antibody) ELISA Kit
孤菲肽受體(痛敏肽受體)(抗原) 3,4-二-1H-2-苯并吡喃
Aniline hydrochlorideMonkey CTX-II (Cross Linked C-telopeptide of Type II Collagen) ELISA Kit
相對定量簡介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡介
公式:
優(yōu)點(diǎn):分析簡單,實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡單
缺點(diǎn):對每一個(gè)基因,每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中用與*的兩種相對定量方法之一。