大鼠胚胎肝母原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠胚胎肝母細胞分離自胚胎肝組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟起源于腹側(cè)前腸內(nèi)胚層細胞（一種多潛能干細胞）。在 ED8.5 的小鼠和 ED9.5 的大鼠，前腸的原始上皮細胞接觸心肌中胚層后快速增殖，形成肝原基。大約1d后，原始上皮細胞侵入原始橫膈，繼續(xù)分化為幼稚肝臟上皮細胞，這些細胞先表達 AFP 然后是ALb。幼稚肝臟上皮細胞很快成熟，并進一步分化為肝細胞或膽管上皮細胞，因為此期的肝臟上皮細胞其具有向這兩種肝實質(zhì)細胞雙向分化的潛能，所以又稱肝母細胞。

方法簡介：

公司實驗室分離的大鼠胚胎肝母細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的大鼠胚胎肝母細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

ARG1 Others Human 人 Arginase-1 / ARG1 人細胞裂解液   EFNB2 Others Canine 狗 Ephrin-B2 / EFNB2 人細胞裂解液   恒河猴腎細胞;RM-3  雪旺細胞SCM-prf  CL-0155ME-180( 永生化細胞 人原代肺微血管周細胞

IL-5 peptide 白細胞介素5抗原 0.5mgIL-5 peptide 白細胞介素5抗原

AIF1 Protein Human 重組人 IBA1 / AIF1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IFNAR1重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 Protein

DDR1 Protein Mouse 重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白

CNTF重組人 CNTF 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

小鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA 試劑盒

Rat ai glucoprotein 210 (gp210) ELISA Kit 大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)試劑盒

HumanCardiacmyosin-lightchains1,CMLC-1ELISAKit 人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)試劑盒 進口分裝

HumanAmylin試劑盒人胰淀素(Amylin)試劑盒

植物蛋白巰基/結(jié)合巰基含量熒光定量試劑盒20次

MonkeyInsulin,INSELISAKit猴胰島素(INS)試劑盒

植物蔗糖含量試劑盒   可見分光光度法    50管/48樣

糖原含量試劑盒   可見分光光度法    50管/48樣

α-試劑盒   可見分光光度法   50管/24樣

β-試劑盒   可見分光光度法   50管/24樣

大鼠胚胎肝母原代細胞植物玉米素核苷(ZR)ELISA 試劑盒

Human alveoli baseme membrane aibody (ABM-Ab) ELISA Kit 人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)試劑盒

PorcineKeratinocyteGrowthFactor,KGFELISAKit 豬角化細胞生長因子(KGF)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforAGAA(Humanai-golgiapparatusaibody)ELISAKit人抗高爾基體抗體

血液腎素(renin)熒光共振能量轉(zhuǎn)移法(FRET)定量試劑盒20次

MouseTissuefactorpathwayinhibitor,TFPIELISAKit小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)試劑盒

IGFBP4重組人 IGFBP4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

視網(wǎng)膜母細胞瘤蛋白1(RB1)重組蛋白 Recombinant Retinoblastoma Protein 1 (RB1)

HIST2H4A重組人 Histone H4 / HIST2H4A 蛋白 Protein

AGRP Protein Human 重組人 AgRP / AGRP 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA Protein H5N8 重組甲型流感 H5N8 (A/duck/NY/191255-59/2002) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)