詳細(xì)介紹
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人宮頸癌細(xì)胞;Hela-Cas9-537傳代方法培養(yǎng)溫馨提示:
1)公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷、治療。
2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件,中心不保證其準(zhǔn)確性。
3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),僅供參考。
4)使用者在接收、處理、保存、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國(guó)內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對(duì)健康或環(huán)境的危害。
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人宮頸癌細(xì)胞;Hela-Cas9-537傳代方法冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品名稱 | 形態(tài)特性 | 發(fā)貨地 | 貨期 |
上皮樣 | 上海 | 3-5天 |
細(xì)胞名稱 Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人宮頸癌細(xì)胞;Hela-Cas9-537傳代方法
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使Hela細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo,經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白,可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法 1:2~1:6傳代;2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:9,10;D12S391:20,25;D13S317:13.3,13.3;D16S539:9,10;D18S51:16,16;D19S433:13,13;D21S11:27,28;D2S1338:17,17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D6S1043:18,19;D7S820:8,12;D8S1179:12,13;FGA:21,21;Penta E:7,17;TH01:7,7;TPOX:8,12;vWA:16,18;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人宮頸癌細(xì)胞;Hela-Cas9-537傳代方法操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱: L(+)-2-氨基-5-脲戊酸 L-Citrulline 含量: BR,99%
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱: L-2,5-二氨基戊酸鹽酸鹽 L-Ornithine HCL 含量: BR,99%
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱: (R)-2,5-二氨基戊酸單鹽酸鹽 D-Ornithine HCL 含量: BR,98%
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱: DL-2,5-二氨基戊酸單鹽酸鹽 DL-Ornithine HCL 含量: BR,99%
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱: L-鳥(niǎo)氨酸乙酯鹽酸鹽 L-Ornithine Ethylester Dihydrochloride 含量: BR,99%
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱: L-天門冬氨酸 L-Aspartic acid 含量: BR,99%