詳細介紹
產(chǎn)品名稱:火雞出血性腸炎病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Turkey Hemorrhagic Enteritis Virus(TuHEV)PCR
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
PCR實驗外包服務:
PCR起源:熒光定量PCR(也稱TaqMan PCR,以下簡稱FQ-PCR)是美國PE(Perkin Elmer)公司1995年研制出來的一種新的核酸定量技術,該技術是在常規(guī)PCR基礎上加入熒光標記探針來實現(xiàn)其定量功能的,與變通PCR相比,F(xiàn)Q-PCR具有許多優(yōu)點。與普通PCR相比,F(xiàn)Q-PCR具有許多優(yōu)點:1、封閉反應,無需PCR后處理。2、特異性強,靈敏度高。3、采用對數(shù)期分析,摒棄終點數(shù)據(jù),定量準確。4、定量范圍寬,可達到10個數(shù)量級。5、儀器在線式實時檢測,結果直觀,避免人為判斷。6、可實現(xiàn)一管雙檢或多檢。7、操作安全,縮短時間,提高效率。熒光定量 PCR是 通過對 PCR 擴增反應中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測從而實現(xiàn)對起始模板定量及定性的分析。
注意事項:
1.基礎程序;
2.擴增溫度和延伸溫度;
3.反應時間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應液的配制;
6.PCR技術的基本原理;
7.PCR的反應動力學;
8.PCR擴增產(chǎn)物;
9.PCR反應體系與反應條件。
【結果分析條件設定】
u 基線(Baseline)設定:應選擇該次實驗指數(shù)擴增前所有樣本熒光信號比較穩(wěn)定的一段區(qū)域(所有樣本熒光信號無較大波動),起始點(Start)應避開熒光采集起始階段的信號波動,終止點(End)應比早出現(xiàn)指數(shù)擴增的樣本Ct值減少1~3個循環(huán),建議基線設為6~15。
u 閾值(Threshold)設定:將閾值線設定在剛好超過正常陰性質控品擴增曲線的點。
【質控標準】
1. 陰性質控品的檢測結果應為陰性,無指數(shù)擴增期,Ct=40或無Ct;
2. 陽性質控品的檢測結果應為陽性,有明顯的指數(shù)擴增期,Ct值應小于等于35;
3. 以上要求需在一次實驗中同時滿足,否則該次實驗視為無效。
【結果判斷】
1. 陽性:有明顯的指數(shù)擴增期,且Ct<38;
2.可疑:有明顯的指數(shù)擴增期,且38≤Ct<40,此時樣本為可疑樣本;對于可疑樣本建議復核一次,若復核結果Ct<40且有指數(shù)擴增期,則判定為陽性,否則判定為陰性;
3. 陰性:無指數(shù)擴增期,Ct=40或無Ct值均判定為陰性樣本。
【對檢驗結果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境污染、試劑污染、樣品交叉污染會出現(xiàn)假陽性結果;
2. 試劑運輸、保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,可能會導致出現(xiàn)假陰性結果。
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特點優(yōu)勢:
1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。