詳細(xì)介紹
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專(zhuān)門(mén)的區(qū)域操作。本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下
產(chǎn)品名稱(chēng) | 鮭魚(yú)立克次氏體PCR檢測(cè)試劑盒 |
英文名稱(chēng) | Piscirickettsia salmonisPCR |
分類(lèi) | PCR檢測(cè)試劑盒 |
特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
BX5 ELISA Kit T-框蛋白5(TBX5)ELISA試劑盒
白細(xì)胞介素29抗體 TBX4 ELISA Kit T-框蛋白4(TBX4)ELISA試劑盒
白介素22受體結(jié)合蛋白抗體 TBX3 ELISA Kit T-框蛋白3(TBX3)ELISA試劑盒
白介素-1受體相關(guān)激酶4抗體 TBX21 ELISA Kit T-框蛋白21(TBX21)ELISA試劑盒
干擾素調(diào)節(jié)因子4抗體 TBX2 ELISA Kit T-框蛋白2(TBX2)ELISA試劑盒
胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體β/IGF-IRβ 抗體 TBX1 ELISA Kit T-框蛋白1(TBX1)ELISA試劑盒
ING4抗體 TWIST ELISA Kit Twist轉(zhuǎn)錄因子(TWIST)ELISA試劑盒
大鼠血清型IgA抗體 T
CD6 ELISA Kit CD6分子(CD6)ELISA試劑盒
小腦肽4抗體 CD68 ELISA Kit CD68分子(CD68)ELISA試劑盒
腦海綿狀血管畸形蛋白2抗體 CD63 ELISA Kit CD63分子(CD63)ELISA試劑盒
表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白2抗體 CD5L ELISA Kit CD5分子樣蛋白(CD5L)ELISA試劑盒
脊索生成素樣蛋白1抗體 CD5 ELISA Kit CD5分子(CD5)ELISA試劑盒
神經(jīng)誘導(dǎo)胚胎發(fā)育相關(guān)蛋白Churchill抗體 CD4 ELISA Kit CD4分子(CD4)ELISA試劑盒
二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白3抗體 CD45 ELISA Kit CD45分子(CD45)ELISA試劑盒
轉(zhuǎn)錄激活蛋白CRSP9抗體 CD44 ELISA Kit CD44分子(CD44)ELISA試劑盒
神經(jīng)網(wǎng)蛋白Cop
鮭魚(yú)立克次氏體PCR檢測(cè)試劑盒WISTNB ELISA Kit Twist鄰位子(TWISTNB)ELISA試劑盒
白介素-17F抗體 TSK ELISA Kit Tsukushin蛋白(TSK)ELISA試劑盒
胰島素生長(zhǎng)因子樣家族成員1抗體 TRIT1 ELISA Kit tRNA異戊基轉(zhuǎn)移酶1(TRIT1)ELISA試劑盒
白介素-17C抗體
Q-PCR技術(shù):
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-time quantitative PCR)/QRT-PCR,是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記物,利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)擴(kuò)增曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。熒光定量PCR不僅實(shí)現(xiàn)真正實(shí)現(xiàn)了定量,而且具有靈敏度和特異性、高能實(shí)現(xiàn)多重反應(yīng)、自動(dòng)化程度高、無(wú)污染、實(shí)時(shí)和準(zhǔn)確等特點(diǎn)。
熒光定量PCR所使用的熒光基團(tuán)可分為兩種:熒光探針和熒光染料。
1.使用SYBR熒光染料法來(lái)進(jìn)行熒光定量PCR時(shí),我們首先在PCR反應(yīng)體系中加入過(guò)量SYBR熒光染料。SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后發(fā)射一定量的熒光信號(hào),而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射熒光信號(hào),從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
2.Taqman探針則是利用探針與模板的特異性結(jié)合的特點(diǎn),以及探針內(nèi)熒光報(bào)告基團(tuán)和淬滅基團(tuán)的分子特性來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)PCR進(jìn)行定量檢測(cè)。這種方法可以實(shí)現(xiàn)高靈敏度,嚴(yán)格針對(duì)特定堿基序列的定量實(shí)驗(yàn)。